不同制备方法对西黄丸体外抑瘤作用影响的比较研究论文

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1、不同制备方法对西黄丸体外抑瘤作用影响的比较研究论文金沈锐，祝彼得，秦旭华，瞿燕【摘要】目的研究不同制备方法对西黄丸体外抑瘤作用的影响。方法采用3种制备方法，即西黄丸浸提液、煎液、含药血清，MTT法分别测定其对两种人恶性肿瘤细胞株（人原发性肝癌细胞株SMMC7721、人早幼粒细胞白血病细胞株HL－60）增殖的影响。结果西黄丸浸提液和煎液均表现出明显的抑瘤作用(P0.05，P0.01)，且抑瘤效应以浸提液为佳(P0.05)；西黄丸含药血清未表现出抑瘤效应.freelouseffectsofXiHuangpelletbydifferentpr

2、ocessingmethods.MethodsLeachate,decoctionandbloodserumofXiHuangpelletanmalignanttumorcellstrains（SMMC7721,HL-60）invitro,proliferationsofcellsinedbyMTTassay.ResultsTheleachateanddecoctionofXiHuangpelletshoultiplicationofhumanmalignanttumorcellstrains(P0.01；P0.05)，andinhib

3、itoryeffectofleachateofXiHuangpelletshoofXiHuangpelletcouldpromotecellmultiplicationjustlikebloodserumofcontrol.ConclusionAntitumouseffectsofXiHuangpelletbydiversemethodsaredifferent.LeachateanddecoctionofXiHuangpelletshoouseffectsinvitro,andleachateofXiHuangpelletisstro

4、ngerthanthatofdecoction.Keyethod；Antitumouseffect；Blood-serumpharmacology；Experimentinvitro西黄丸为中药抗癌名方，功效为活血化瘀、清热解毒、消肿止痛。目前国内有临床文献报道，西黄丸可用于乳腺癌、肝癌、白血病等多种恶性肿瘤的治疗，并取得了较好的疗效［1，2］。西黄丸为中药复方丸剂，如何开展传统复方的现代体外实验研究，采用何种制备方法，不同的制备方法是否会明显地影响药效，这是中药复方体外研究必须面对的问题。为此，结合前人研究经验，我们选择了3种制备方法

5、，即：西黄丸浸提液、西黄丸煎液、西黄丸含药血清，并通过MTT法对它们的体外抑瘤效应进行了比较。1材料与仪器1.1药物西黄丸，九寨沟天然药物集团有限公司生产，批号：030501。1.2西黄丸浸提液、煎液、含药血清制备方法1.2.1西黄丸浸提液采用密闭容器，以预冷4℃的RPMI-1640培养液浸泡西黄丸24h（比例为0.1g/ml），超声振荡助溶2h，复以4℃下继续浸泡48h后取上清液，用0.22μm微孔滤器过滤后，得到西黄丸浸提液。实验时用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度使用。1.2.2西黄丸煎液采用密闭容器，以预冷4℃的RPMI-

6、1640培养液浸泡西黄丸24h（比例为0.1g/ml），超声振荡助溶2h后，取有冷凝回流装置的三角烧瓶加热至沸腾20min，复以4℃下继续浸泡48h后取上清液，0.22μm微孔滤器过滤后，得到西黄丸煎液。实验时用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度使用。1.2.3西黄丸含药血清根据文献［3］取SD大鼠9只，雄性，体重180～200g,分为3组，每组3只，设西黄丸混悬液高剂量、低剂量、空白组，分别给予西黄丸混悬液高剂量（0.96g/kg）、西黄丸混悬液低剂量（0.48g/kg）（西黄丸每日人用量6g,以50kg为正常人体重计算，动物给药

7、量相当于人用量18，9倍），空白组予等体积蒸馏水，每日1次灌胃给药；连续7d，末次给药2h后，通过经一侧颈总动脉插管后采血，分离血清，56℃30min灭活，0.22μm微孔滤膜过滤，分装后，-72℃备用，使用时用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度使用。1.3试剂DMSO、MTTSigma公司产品；1640培养基Gibco公司产品；胰蛋白酶Serva公司产品；新生小牛血清，三利生物制品厂产品。1.4动物SPF级SD大鼠，雄性，体重180～200g，成都中医药大学实验动物中心提供，实验动物合格证号号：SCXK（川2004-12）。1.5

8、细胞株①人原发性肝癌细胞株SMMC7721；②人早幼粒细胞白血病细胞株HL－60细胞株，由本校病理教研室提供；均用含10%新生小牛血清的RPMI-1640培养基培养。1.6仪器SANYOLaboAutocl