艾灸对不同肿瘤模型的抑瘤机制研究

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1、上海交通大学硕士学位论文艾灸对不同肿瘤模型的抑瘤机制研究硕士研究生：周俊梅学号：1127249509导师：张必萌副教授申请学位：硕士学科：中医骨伤科学培养单位：上海交通大学附属第一人民医院资助基金项目:上海市科委项目(11140900902)答辩日期：2015年4月授予学位单位：上海交通大学DissertationSubmittedtoShanghaiJiaoTongUniversityfortheDegreeofMasterStudyontheanti-tumormechanismofmoxibusti

2、onofdifferentxenograftmodelsCandidate：ZhouJunmeiStudentID:1127249509Supervisor：AssociatedProf.ZhangBimengAcademicDegreeAppliedfor：MasterSpeciality：orthopedicsandtraumatologyofTCMFirstPeople’sHospital,ShanghaiNameofAffiliation：JiaotongUniversitySchoolofMed

3、icineShanghaiMunicipalScienceandFundProject:TechnologyCommission(No.11140900902)DateofDefence：Apr,2015Degree-Conferring-Institution：ShanghaiJiaoTongUniversity上海交通大学学位论文原创性声明：本人郑重声明所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发

4、表或撰写过的作品成果。对本文。的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中明确方式标明本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名；曰期；年ｉ月曰上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可［＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。

5、保密□，在＿年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密＂＂（请在上方框内打Ｖ）学位论文作者签名；词模裕指导教师签名；上海交通大学硕士学位论文艾灸对不同肿瘤模型的抑瘤机制研究摘要目的：观察艾灸对不同小鼠移植瘤类型的抑瘤效果，并利用基因/蛋白芯片技术研究艾灸抑瘤作用机制。方法：（1）本课题选用恶性黑色素瘤细胞株B16和乳腺癌细胞株4T1，分别在体外构建小鼠移植瘤模型；（2）利用（47±1）℃的恒定高温灸治疗小鼠B16黑色素移植瘤以及4T1乳腺癌，观察其抑瘤作用；（3）应用基因芯片技术

6、和蛋白芯片技术筛查肿瘤细胞内免疫细胞和微环境中的炎性因子表达的变化，并采用高通量分析方法得出其作用的信号通路及预测靶基因。结果：（1）成功构建了稳定携带生物发光荧光素酶（Luciferase）基因的细胞株，并在体外构建小鼠移植瘤模型：B16-F10/luc和4T1/luc；（2）利用（47±1）℃的恒定高温灸治疗小鼠B16黑色素移植瘤以及4T1乳腺癌，观察到：治疗早期（<9days），艾灸对这两种肿瘤模型都有明显的直接抑瘤作用。然而，随着病程的延长（>12days），我们观察到艾灸抑瘤的长期疗效欠佳。在B

7、16-F10/luc肿瘤组织中还伴有范围广程度较重的坏死和弥散性出血灶，以对照组最为严重；而艾灸能明显抑制肿瘤坏死和出血，尤以大椎组最佳。在4T1/luc肿瘤组织中，未见坏死和出血；（3）通过基因芯片对实验组和对照组I上海交通大学硕士学位论文肿瘤组织进行差异表达基因的筛查，筛选出33个显著差异基因，193个差异lncRNA，8个差异MicroRNA。蛋白芯片技术在检测的160个细胞因子中，共检测出显著差异因子共有3个。采用软件对发现的差异表达基因进行功能分类分析和信号转导通路分析发现，涉及免疫机制、血管生

8、成、信号转导、肿瘤代谢等多个生物过程，表明艾灸是通过多途径发挥抗肿瘤作用。结论：研究证实大椎穴或关元穴化脓灸能显著抑制早期乳腺癌生长，而中后期抑瘤效果欠佳；但基因/蛋白芯片发现艾灸能导致肿瘤内免疫细胞和微环境中的炎性因子表达发生变化，早期恶性肿瘤的预后可能与这些差异表达的基因及细胞因子有关。关键词：艾灸；肿瘤；基因芯片；蛋白芯片II上海交通大学硕士学位论文STUDYONTHEANTI-TUMORMECHANISMOFMOXIB