复方中药ccm┐at13抗胃癌sgc┐7901细胞作用机制论文

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1、复方中药CCM┐AT13抗胃癌SGC┐7901细胞作用机制论文.freelgL-1CCM-AT13，5-FU与华蟾素的杀伤率分别为（87.2±3.3）%，（34.5±3.0）%与（29.7±1.7）%.freelachneoplasm;medicine，Chinesetradition-al;MTTAbstract:AIMToinvestigatetheeffectsofapoundChinesetraditionalmedicine（CCM-AT13）ongastriccancercellandnormalcells.METHODSMTTassayandcytocidalratepl

2、oyed.RESULTSCytocidalratesofofCCM-AT13，5-FUandHuachansuat10mgL-1concentrationarkedlyhigh-erthanthatof5-FUandHuachansuinjection.CONCLU┐SIONCCM-AT13haspotentantitumoreffectsandgreatclinicalvalue.0引言中药治疗肿瘤在我国已有悠久历史，近年来，世界各国对中草药抗肿瘤的机制进行了广泛的研究［1，2］.胃癌是我国常见恶性肿瘤之一，目前对于半数无法手术切除的中晚期胃癌及术后患者联应用联合化疗方案治疗效果并不

3、理想［3，4］，寻找更有效的治疗胃癌手段，改进胃癌治疗现状是目前抗肿瘤研究的重要课题之一.我科根据胃癌解剖学特点结合中医外科学知识自组复方中药并制备成注射剂CCM-AT13，成分为皂角刺、乌梅、白芨与大黄.我们研究目的是用MTT实验［5-7］将结果与华蟾素、5-FU作对比，以了解CCM-AT13对SGC-7901细胞、人血管内皮细胞与大鼠平滑肌细胞的作用.1材料和方法1.1材料人胃癌SGC-7901细胞系（本校西京医院消化病研究所提供，本室传代保存）;人血管内皮细胞、大鼠血管平滑肌细胞（本校唐都医院高血压研究室培养提供）;复方中药CCM-AT13注射液（本科研究组方并制备的注射剂，由皂

4、角刺、乌梅、白芨与大黄四味组成，质量比例为2∶2∶1∶1，每毫升含原生药0.5g，色淡黄，透明，pH6.5）;华蟾素注射液（Huachansu，中国淮北生化制药厂）;5-FU针剂（天津河北制药总厂）;MTT试剂（美国Sigma公司）;RPMI1640细胞培养液（美国Gibco公司）.1.2方法人胃癌SGC-7901细胞在37℃，50mLL-1CO2孵箱内培养，于含100gL-1小牛血清的RPMI1640细胞培养液中贴壁生长，以EDTA-胰酶混合液消化传代.将呈对数生长的细胞分别以1×108L-1（人胃癌SGC-7901细胞、人血管内皮细胞）与5×108L-1（大鼠血管平滑肌细胞）接种于

5、96孔板上，每孔100μL，然后按一定的浓度梯度分别加入复方中药、华蟾素与5-FU，每一浓度加4孔，每孔100μL，对照组加同量的培养液，调零组只加培养液200μL，孵育48h后，每孔加入50μLMTT（2gL-1），继续孵育4h，然后倾去所有液体，每孔再加入DMSO150μL，以酶联免疫仪490nm波长测定各孔A（OD）值，计算不同药物不同浓度下培养细胞的存活率［SR=（用药组A（OD）值/对照组A（OD）值）×100%］［8］及药物对细胞的杀伤率（CR=1-SR）.统计学处理:采用SPLM统计软件（本校预防医学系统计学教研室提供）进行统计处理.2结果2.1存活率与药物浓度曲线以细胞

6、的存活率和药物浓度绘制曲线可见SGC-7901细胞的存活率随3种药物的浓度增加而下降，CCM-AT13在2mgL-1浓度水平即可达到50%的杀伤率，5-FU与华蟾素的IC50值均10mgL-1（Fig1）.2.2复方中药CCM┐AT13对人胃癌SGC┐7901细胞的杀伤作用在每同一浓度水平，CCM-AT13对人胃癌SGC-7901细胞的杀伤作用都明显高于华蟾素与5-FU（P0.05，Fig2），华蟾素与5-FU作用相差不显著（P0.05）.在10mgL-1浓度水平，CCM-AT13，5-FU与华蟾素的杀伤率分别为（87.2±3.3）%，（34.5±3.0）%和（29.7±1.7）%.2

7、.3复方中药CCM┐AT13对人血管上皮细胞、大鼠血管平滑肌细胞的作用复方中药在10mgL-1，50mgL-1浓度水平对培养的人血管内皮细胞、大鼠血管平滑肌细胞的杀伤作用明显低于对人胃癌SGC-7901细胞的杀伤作用（P0.01），CCM-AT13在10mgL-1浓度水平对人胃癌SGC-7901细胞、大鼠血管平滑肌细胞与人血管内皮细胞的杀伤率分别为（87.2±3.3）%，（19.2±1.7）%与（15.3±2.1）%（Fig3）.在50mgL-