细胞移植研究用兔心肌梗死动物模型的探讨论文

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1、细胞移植研究用兔心肌梗死动物模型的探讨论文【摘要】目的目的探索兔冠状动脉左室支结扎处理的适宜方法，建立适合细胞移植研究的稳定、可靠的急性，心肌梗死(AMI)动物模型。方法应用在自主呼吸条件下，不用呼吸机支持，迅速开胸行冠状动脉左室支结扎。结果心梗造模组胸前导联V2、V5，ST段有一定程度的抬高，心肌酶谱升高。结论本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简单、重复性好、结果可信。【关键词】冠状动脉心肌梗死动物模型【Abstract】ObjectiveToexplorethefeaslbllityofestablishmentofaeutemyoeardialinfaretion(AMI)Mode

2、lsindueedbyocclusionofleftanteriordescendingeoronaryartery，odelforthestudyofrepairmyocardialinfarctionbycellulartransplantationinrabbit.Methods:Inthespontaneousbreathingcondition,yocardialinfarctioninthemodelprecordialleadsV2,V5,STsegmentelevationtoacertainextent,myocardialenzymesincreased.Conclu

3、sionThisexperimentprovidedaneasyode,lal心肌梗死(myocardialinfarction,MI)是心血管病中最危重的急性事件.freell/kg）腹腔注射麻醉。2.2备皮、消毒将大耳白兔仰卧位固定于手术台，剪除胸前区毛，碘伏常规消毒。2.3做术前心电图参见《实验动物学》，采集Ⅱ、V2、V5导联。2.4开胸沿胸骨左缘纵行切口，切断左侧第5肋软骨,暴露纵隔及心脏，两侧胸膜完整,纵行切开心包,用自制心脏固定圈轻轻将心脏向右上抬起,即可充分显露左室支。2.5结扎于左心耳下约2mm处用6-0带线缝合针缝扎左室支。左心室前壁及心尖部颜色变暗,搏动减弱，表明左室

4、支完全结扎。2.6术后心电图以心电图胸前两个导联出现ST段抬高为成功标志，观察前降支支配区域心肌颜色变暗后，关闭胸腔。如未出现上述表现，再行结扎术。2.7关胸心包不缝,逐层关胸，缝合外皮。术后青霉素80万单位肌注控制感染。3指标检测3.1抽血术后24小时耳中动脉抽血，离心（3000转/分）。3.2ELISA检测试剂盒监测CK-MB的含量4结果结扎冠脉前与结扎冠脉后心电图的比较结果：在结扎兔左室支后，胸前导联V2、V5，ST段有一定程度的抬高，提示前壁心梗，心电图证实急性心梗模型制备成功。（见图1、2）图1结扎冠脉前心电图图2在结扎兔左室支冠脉后，肢导Ⅱ、胸导V2、V5，ST段有一定程度的

5、抬高，提示前壁心梗，心电图证实急性心梗模型制备成功。术后24小时造模组CK-MB明显增高。5讨论5.1本实验选用日本大耳白兔，方便于耳部取血。兔子的静脉壁则相当薄，因此在抽血及输液过程中，常有血肿的形成；要避免这种现象的发生，试验过成中选择用静脉留置针使用均匀的压力是很重要的。5.2造模方法选择MI动物模型的制作有多种方法，各有利弊，也因人而异。早期国外多采用Johns法2，即在自主呼吸条件下，不用呼吸机支持，迅速开胸挤出心脏行冠状动脉结扎。这种方法需要在极短的时间内完成操作，技术要求高，难度大，难以掌握；而且由于心脏移位，容易导致血流动力学紊乱和心律失常等并发症；开胸后小动物呼吸无法得

6、到保证，因而手术死亡率极高。此后Fisbein3和Pfeffer4在Johns法的基础上略加改进，应用小动物呼吸机维持呼吸，明显提高了手术的成活率，但是又增加气管切开的的创伤，延长手术时间势必会增加感染机会。本实验选择Johns法造模，意在减少创伤及手术创伤的时间。实验过程中，取截断一截第五肋骨的方法，可有效地暴露术野。在剥离过程中紧贴截取肋缘剥离，避免伤及第四肋间血管，造成大失血。剥离心包时避免伤及胸膜形成气胸。气胸处理:关胸后立即用注射器抽出胸腔空气，注意观察呼吸运动。术后会出现心衰症状，注意术后护理及术后摆放体位。5.3死亡原因讨论：A组死亡一只，原因护理不当，死于肠炎。B组死亡三

7、只，心梗后心衰一只，造模后伤及胸膜形成气胸导致纵膈摆动死亡2只。未出现麻醉意外及感染导致死亡。5.4此试验方法复合心肌梗死的病理学改变，适合做心肌梗死的实验研究。心梗早期，细胞坏死引起一系列信号的释放，有利于干细胞趋化至损伤部位，同时心梗早期局部血管扩张，提高了干细胞在局部的聚集。干细胞炎症归巢的定向移行有赖于干细胞表面分子和损伤局部的趋化因子相互作用。但相对于心肌梗死局部，开胸术区炎症反应更为强烈；开胸造心梗模型，双重的打击，体内