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1、细胞移植研究用兔心肌梗死动物模型的探讨【摘要】目的目的探索兔冠状动脉左室支结扎处理的适宜方法，建立适合细胞移植研究的稳定、可靠的急性，心肌梗死(AMI)动物模型。方法应用在自主呼吸条件下，不用呼吸机支持，迅速开胸行冠状动脉左室支结扎。结果心梗造模组胸前导联V2、V5，ST段有一定程度的抬高，心肌酶谱升高。结论本文建立心肌梗死动物模型的方法操作简单、重复性好、结果可信。【关键词】冠状动脉心肌梗死动物模型【Abstract】ObjectiveToexplorethefeaslbllityofestablishmentofaeutemyoeardialinfaret
2、ion(AMI)Modelsindueedbyocclusionofleftanteriordescendingeoronaryartery，odelforthestudyofrepairmyocardialinfarctionbycellulartransplantationinrabbit.Methods:Inthespontaneousbreathingcondition,yocardialinfarctioninthemodelprecordialleadsV2,V5,STsegmentelevationtoacertainextent,myocard
3、ialenzymesincreased.Conclusion Thisexperimentprovidedaneasyode,lal心肌梗死(myocardialinfarction,MI)是心血管病中最危重的急性事件，近年来的发病有明显的增高趋势。是21世纪医学亟待解决的难题之一[1]。由于成熟的心肌细胞缺乏再生能力，心肌梗死后，发生退行性左心室重构，最终导致顽固性心力衰竭。目前的药物治疗和介入方法不能从根本上修复已坏死的心肌组织，外科的心脏移植由于组织匾乏和移植后易发生血管病等因素使其在临床上的应用受到限制，有资料显示终末期心功能不全的五年死亡率仍大于50
4、%。细胞移植采用生物学技术将多种组织的细胞，进行自体心肌内移植，替代、修复或加强受损的心肌组织的生物学功能。由于MI的许多病理生理资料难以从临床研究中获得,其防治上的进展有赖于基础研究上的突破。MI动物模型的建立是开展基础研究的第一步,它对于研究人类MI的病理生理变化、心电生理改变以及评价各种治疗方法具有重大价值。结扎左前降支制作MI模型,是一个被广泛接受近于成熟的动物实验模型。但随着实验技术的发展,它的一些操作步骤、评价指标等方面仍需进一步改进。本实验在传统方法的基础上作了相应的改进,以日本大耳白兔为实验对象建立MI动物模型,方法操作简单、模型成功率高、重复
5、性好,为下一步的实验研究奠定了基础。1实验材料1.1实验动物所用实验动物（scxk(辽)2004-0018）由辽宁中医药大学实验动物中心提供。处置方法符合动物伦理学要求。取体重在2-3kg。3月龄左右。雌雄不限，共70只。分组:随机分为：正常A组（10只）。造模组B组（10只）,间体重差异无显着性(2.4±0.3kg、2.5±0.2kg)1.2仪器与试剂试剂：乌拉坦,分析纯，4%多聚基甲醛,分析纯，（沈阳试剂二厂）。心梗造模使用仪器来自辽宁中医药大学实验中心。2试验方法心肌梗死模型的建立2.1麻醉乌拉坦（3-4ml/kg）腹腔注射麻醉。2.2备皮、消毒将大耳白
6、兔仰卧位固定于手术台，剪除胸前区毛，碘伏常规消毒。2.3做术前心电图参见《实验动物学》，采集Ⅱ、V2、V5导联。2.4开胸沿胸骨左缘纵行切口，切断左侧第5肋软骨,暴露纵隔及心脏，两侧胸膜完整,纵行切开心包,用自制心脏固定圈轻轻将心脏向右上抬起,即可充分显露左室支。2.5结扎于左心耳下约2mm处用6-0带线缝合针缝扎左室支。左心室前壁及心尖部颜色变暗,搏动减弱，表明左室支完全结扎。2.6术后心电图以心电图胸前两个导联出现ST段抬高为成功标志，观察前降支支配区域心肌颜色变暗后，关闭胸腔。如未出现上述表现，再行结扎术。2.7关胸心包不缝,逐层关胸，缝合外皮。术后青霉
7、素80万单位肌注控制感染。3指标检测3.1抽血术后24小时耳中动脉抽血，离心（3000转/分）。3.2ELISA检测试剂盒监测CK-MB的含量4结果结扎冠脉前与结扎冠脉后心电图的比较结果：在结扎兔左室支后，胸前导联V2、V5，ST段有一定程度的抬高，提示前壁心梗，心电图证实急性心梗模型制备成功。（见图1、2）图1结扎冠脉前心电图图2在结扎兔左室支冠脉后，肢导Ⅱ、胸导V2、V5，ST段有一定程度的抬高，提示前壁心梗，心电图证实急性心梗模型制备成功。术后24小时造模组CK-MB明显增高。5讨论5.1本实验选用日本大耳白兔，方便于耳部取血。兔子的静脉壁则相当薄，因此
8、在抽血及输液过程中，常有血肿的形成；要
