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《脑宁康颗粒对脑缺血预适应大鼠hsp70表达影响的实验研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、脑宁康颗粒对脑缺血预适应大鼠HSP70表达影响的实验研究论文【摘要】目的观察中药脑宁康(NNK)颗粒对经脑缺血预适应(IPC)处理后大鼠HSP70表达的影响。方法根据Pulsinelli四管法及Liu法分别制作大鼠IPC及脑缺血再灌注(IR)模型，应用免疫组化SP法作HSP70染色，比较NNK颗粒对IPC和IR两种模型大鼠HSP70表达的影响，并以阿斯匹林作对照。结果NNK在两模型中均可使HSP70表达明显增强(P0.05～0.01),且效应显著高于阿斯匹林(P0.05)，但两模型之间比较无显著性差
2、异。且NNK能够延缓HSP70表达强度的减弱。结论NNK颗粒通过增强IPC和缺血状态中HSP70表达，扮演了强化IPC及药物预适应角色，旨在增加脑神经细胞对缺血、缺氧的耐受力，并通过对HSP70的干扰.freelicprecondition.MethodsTherats'IPCandischemicreperfusion(IR)modelsadebymethodsofPulsinellifourtubesandLiurespectively.TheexpressionofHSP70intodelsi
3、ncludingIPCandIRmunohistochemistrymethod.ResultsNNKparticlecouldincreasetheHSP70expressionofIPCandinthestateofischemiaandplaytheroleonstrongingischemicpreconditionofIPCandmedicine.TheeffectofNNKparticlesuggestsincreasingthetoleranceofcentralnervecellsf
4、acingtoischemiaandhypoxia.ConclusionNNKparticlealsocanstabilizethestructureofneuronthroughinterfereonstratethepharmacologiceffectofkeepingtheneuronnormalfunctions.Keyicpreconditioning;Brain;HSP70近年来，脑缺血预适应(ischemicpreconditioning,IPC)过程中产生的机体重要保护因子热休克蛋
5、白（Heatshockprotein,HSP）已引起广泛关注。对整体和离体经应激作用后的细胞或组织的研究表明［1］，当细胞受到损伤时，均伴随HSP含量增加。因而，普遍认为HSP的功能主要是在于稳定细胞的结构，从而维护细胞的正常生理功能。在脑缺血损伤领域的研究显示，HSP具有保护脑细胞，增加脑细胞对缺氧的耐受性，明显降低神经元对谷氨酸毒性作用的敏感性［2］，从而抵抗神经元进一步致死性损伤的作用。本研究拟观察HSP70在IPC和脑缺血再灌注(ischemicreperfusion,IR)中的表达及脑宁康
6、(NNK)对其的影响。现报道如下。1材料与仪器1.1仪器多功能显微镜(OLYMPUS-269865,JAPAN)，电镜（JEM-1200EX,JAPAN），医用低温冷冻冰箱（SANYO,JAPAN），电子蠕动泵（LDB-M）。1.2试剂与药品鼠抗HSP70单克隆抗体（NeomarkerCorporation,USA），链卵白素－生物素结合辣根过氧化酶，1∶300zymed,USA)，染色试剂盒（LabvisionCorporation,USA）。NNK颗粒由山东中医药大学附属制剂厂生产，生药含量为5
7、g/g；肠溶阿斯匹林(ASP)为沈阳克达药厂生产，批号970208。1.3动物雄性ODEL)、假手术组(FO)、ASP组和NNK组,每组均按IPC方法和IR方法制模,.freelg/kg经腹腔注射麻醉，颈部正中线纵行切口，分离暴露第1颈椎，寻找双侧翼小孔，电灼封闭双侧椎动脉。翻转体位，颈部纵行切口，分离暴露双侧颈总动脉约2cm，4号手术线牵引。头部正中切口，顶部钻孔，埋藏微电极，齿科水泥固定。动脉夹夹闭两侧颈总动脉，造成全脑缺血，微电极连接八道生理仪观察脑电图,验证缺血效应。缺血3min后,松开动脉
8、夹，恢复供血，缝合皮肤，按成人剂量7倍分别给予NNK组及ASP组相应药物。24h后，再次夹闭两侧颈总动脉3min。假手术组依上法操作,但不封闭及夹闭椎动脉、颈总动脉。各组饲以标准合成饲料,自然饮水。2.3.2IR模型制备IR模型制备方法同上，但不进行两次3min缺血预适应处理，服药时间与IPC模型同步。在IPC模型第2次短暂缺血后72h，除假手术组外的其余6组均再次夹闭颈总动脉10min，并于缺血再灌注24h后取血备测。2.3.3取材分别于IR后24，72h，戊巴比妥
