益脑颗粒对亚急性衰老大鼠慢性脑缺血模型脑组织中hsp70表达的影响

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1、益脑颗粒对亚急性衰老大鼠慢性脑缺血模型脑组织中HSP70表达的影响：钟丽红魏春敏李鲁杨【摘要】目的观察益脑颗粒对慢性脑缺血大鼠脑组织中HSP70表达的影响，探讨益脑颗粒治疗慢性脑缺血的作用机制。方法采用Dgal注射诱导亚急性衰老大鼠模型，永久性双侧大鼠颈总动脉结扎术(2VO)制备亚急性衰老大鼠慢性脑缺血模型。给予高、低剂量益脑颗粒灌胃，并以尼莫地平为对照，免疫组化法观察大鼠脑组织中HSP70表达。结果模型组脑组织中HSP70表达无明显改变(P>0.05)，益脑颗粒高、低剂量组表达升高(P<0.01)，尼莫地平组无明显改变(P>0.05)。结论益脑颗

2、粒能通过增加缺血脑组织中HSP70的表达，改善慢性脑缺血。【关键词】补肾活血方;慢性脑缺血;衰老大鼠;HSP70　　【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofYinaogranuleontheHSP70expressioninbrainofchroniccerebralischemiamodelofsubacuteagingrats.MethodsHealthymaleodel,highdose,loodipinegroups.Subacuteagingmodeliamodeladebyligationofbilateralart

3、eriacarotis.TheexpressionofHSP70easuredbyimmuohistochemicalmethod.ResultsThereodelandcontrolgroup(P>0.05).Thereodipinegroup.ConclusionsYinaogranulecanimprovetheHSP70expressioninbrainofischemiccerebraltissue,andpretectbraincellbypreventingoxidationandinhibitingapoptosisofnervecells.　　

4、【Keyia;Rats;HSP70　持续性脑血流量下降引起多种细胞因子及抗凝因子比例失衡，是血管性痴呆、Alzheimer病和Binswanger病等多种疾病发展过程中的一个共同病理过程，尽快改善和恢复缺血损伤脑组织的血液供应是慢性脑缺血治疗的关键。细胞在受到缺氧、氧化损伤、病毒感染和免疫紊乱等各种应激因素损伤时，为适应周围微环境的改变，会暂时性下调多种细胞自身产物和选择性上调热休克蛋白(HSP)的表达〔1〕。HSP的诱导表达具有保护细胞免受微环境中各种有害因素的损伤，减小组织的梗死面积，减轻脏器损伤，以及降低致死性应激状态下动物死亡率的作用〔2〕。正常脑组织中HSP

5、70含量极少，缺血缺氧时表达增多，沙土鼠脑缺血后，HSP70的表达主要位于海马及大脑皮层〔3〕。益脑颗粒是以中医基础理论为指导，结合现代医学研究成果拟定的，由黄芪、制首乌、银杏叶、大黄、莪术、水蛭、三七粉等多味中药组成，具有健脾益脑、补肾活血之功效。本研究应用衰老大鼠慢性脑缺血模型，观察益脑颗粒对脑组织HSP70表达的影响，阐明本方改善慢性脑缺血的作用机制。　　1材料与方法　　1.1动物及分组6周龄清洁级健康雄性SD大鼠60只，体重(200±20)g，由山东大学实验动物中心提供。随机分成正常组、模型组、益脑颗粒高、低剂量组、尼莫地平组，每组12只。　　1.2药品与仪器

6、黄芪、何首乌、银杏叶、大黄、莪术、水蛭、三七粉等中药饮片购自山东省医药采购供应站;D半乳糖(Dgal)由北京拜尔迪生物公司提供(批号：00637);尼莫地平片由山东新华制药股份有限公司生产(批号：0605173)。　　1.3.2制备益脑颗粒黄芪、何首乌、银杏叶、大黄、莪术等粗粉按5∶5∶2∶2∶2比例，分别加入10、8、8倍量水，煎煮提取3次，静置沉淀24h，上清液浓缩成膏，烘干、粉碎成细粉，加入水蛭粉(水蛭低温烘干粉碎)和三七粉(投药量均为黄芪的1/10)混匀，平铺一薄层，紫外灯照射45min，加入95%酒精，用12目筛制粒，60℃～80℃干燥，整粒，每克益脑颗

7、粒相当于生药4.2g。　　1.3.3给药益脑颗粒以蒸馏水稀释成30和15mg/ml混悬液，高、低剂量组分别按0.6和0.2g·kg-1·d-1灌胃给药，尼莫地平组以40mg·kg-1·d-1给予尼莫地平混悬液(2mg/ml)灌胃，模型组和正常组灌服等量蒸馏水，每天两次给药，4atchmakers〔J〕.JLabClinMed，1991;124(1):317.　　4李旺辉,李开荣,萧洪文,等.IGF1对大鼠局灶性脑损伤HSP70表达的影响〔J〕.陕西医学杂志,2009;38(1):113.　　5张辉,牛书雷,王发亮,等.缺血再灌注大鼠额叶皮质内B