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1、荞麦花叶总黄酮对大鼠急性压力负荷c论文【关键词】心肌肥厚Effectoftotalflavonesofbuckodelsofmyocardialhypertrophycausedbyabdominalaorticbandingg/(kg/d）beforeoperation.At1,3and12hafteroperation,theexpressionofcfosmunohistochemistryfolloinalaorticbandingandreachedapeakat3h,decreasedat12h.paredodelsofmyocardialhyper
2、trophy,TFBFL0.4,0.2and0.1g/(kg/d）reducedtheexpressionofcfosby21.41%(P0.01),14.52%(P0.05)and10.36%after3hofabdominalaorticbanding.CONCLUSION:TFBFLcandecreasetheexpressionofcfosinthecourseofacutepressureoverloadoftheleftventricleinrats.【Keyyocardialhypertrophy;totalflavones;pressureove
3、rload;buckg/(kg/d）.分别于狭窄后1，3和12h处死动物取材.用免疫组化方法检测左室心肌cfos蛋白的表达.结果：正常大鼠心肌没有或仅有少量cfos表达，腹主动脉狭窄后1h,cfos表达明显增加，3h达高峰，较对照组升高约3倍，12h开始下降.腹主动脉狭窄后3h,TFBFL0.4,0.2和0.1g/(kg/d）与心肌肥厚组相比,.freelL/kg)后，行腹部正中切口，在双侧肾动脉上方游离一段腹主动脉，沿腹主动脉平行置一直径为0.7mm的小圆棒(7号针头磨制)，用0号丝线绕腹主动脉和小圆棒一起结扎，随后抽出小圆棒，则使腹主动脉部分狭窄.假手术组除
4、不用丝线结扎外，其余操作步骤相同.1.2.2实验动物分组取心电图(ECG)正常的健康大鼠108只，按随机数字表法随机分为6组，即假手术组，肥厚模型组，TFBFL高、中和低剂量干预组及阳性药物卡托普利对照组，每组动物再随机分为1，3和12h，3个时间点.TFBFL干预组于术前分别给予0.4,0.2和0.1g/(kg/d）灌胃（ig），卡托普利组ig60mg/(kg/d)共3d.末次给药后2h进行手术.1.3检测指标取左心室心尖部组织用40g/L甲醛固定，常规石蜡包埋、切片.切片脱蜡至水，0.3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，热修复抗原后,100ｍＬ/Ｌ正常山羊血清
5、封闭非特异性抗原，滴加一抗(1∶100稀释，兔抗鼠多克隆抗体)4℃过夜;滴加生物素标记的二抗，37℃孵育30min；滴加辣根酶标记的链霉卵白素工作液，DAB显色，苏木素复染，脱水、透明、封片.以PBS代替一抗作阴性对照.应用MoticMed6.0数码医学图像分析系统对免疫组化图片进行图像分析，结果用积分光密度值表示，间接反映cfos蛋白的相对含量.统计学处理:实验数据用计算机instat软件处理,所有数据以x±s表示，组间差别采用方差分析检验，P0.05认为差异有统计学意义.2结果2．1cfos蛋白表达的时间进程正常大鼠左心室肌仅有少量cfos阳性细胞表达,阳性
6、细胞胞核着棕黄色（图1A）.压力超负荷后不同时间点cfos阳性细胞不同程度地表达(表1),阴性对照组未见cfos阳性细胞表达（图1B）,由表1可见腹主动脉狭窄后1h大鼠左心室cfos表达明显升高，3h达高峰（图1C），较对照组升高约3倍，12h已经开始下降.2．2TFBFL对cfos蛋白表达的影响由表1及图1D可见阳性药物卡托普利可明显抑制cfos的表达，TFBFL可抑制左心室cfos的表达,高剂量优于中低剂量（图1E~F）.以腹主动脉狭窄后3h大鼠左心室cfos表达为例，TFBFL高、中、低剂量与心肌肥厚组相比,积分光密度分别降低21.41%(P0.01)，1
7、4.52%(P0.05)和10.36%.A:假手术组3hcfos的表达×400;B:阴性对照组cfos的表达×400;C:肥厚组3hcfos的表达×400;D:卡托普利组3hcfos的表达×400;E:TFBFL高剂量组3hcfos的表达×400;F:TFBFL中剂量组3hcfos的表达×400.图1心肌cfos蛋白免疫组化染色（略）表1TFBFL对cfos蛋白表达的影响（积分光密度值）（略）bP0.01vs假手术组;cP0.05,dP0.01vs肥厚模型组.3讨论本实验通过部分结扎腹主动脉的方法造成大鼠急性压力负荷心肌肥厚模型，观察cfos蛋白表达情况，并用药
8、物TFBFL进行干预.结
