哮喘患者诱导痰上清液mip论文

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1、哮喘患者诱导痰上清液MIP论文［摘要］目的:通过测定哮喘患者诱导痰上清液肺泡巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)、肺泡巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)的水平,探讨三者在哮喘发病中的作用。方法:轻、中度哮喘患者14例，正常人12例，用高渗盐水进行痰诱导，痰液经解粘、离心后，对沉淀细胞分类计数，使用ELISA测定诱导痰上清液中MIPlα、MIF、MCP1浓度。结果:哮喘组诱导痰嗜酸粒细胞、淋巴细胞相对计数均高于正常组（分别为7.7%±1.4%、0.7%±0.8%,P0.01;4.2%±1.0%、2.1±0.8%,P0.01），而哮喘组诱导痰肺泡巨噬细胞相对计数构成比

2、（57.8%±3.7%）明显低于正常组(65.9%±3.6%,P001)。哮喘患者诱导痰上清液MIP1α质量浓度［（36.6±4.8）pgml-1］明显高于正常人［（32.6±1.7)pgml-1,P005］，两组诱导痰上清液MIF、MCP1浓度无显著差异。哮喘患者诱导痰上清液MIF与嗜酸粒细胞相对计数呈正相关(r=053.freelin后超声雾化吸入3％高渗盐水30~50ml30min。雾化过程中鼓励患者咳嗽、咳痰，有痰时漱口，咳痰至硅化的玻璃烧杯中，如出现症状(喘息、严重咳嗽或呼吸困难)，则随时终止导痰。然后加入相当于痰液4倍体积的含01％二硫苏糖醇(DDT)的Hanks平衡盐溶液(H

3、BSS)，置37℃恒温水浴箱中孵化15min，用快速液体混合器震荡15s，摇床上摇15min，用两层无菌纱布过滤，离心(1000g)10min，将上清液在-70℃冰箱保存待测，并取少许沉淀细胞涂片瑞氏染色，进行细胞分类计数。采用ELISA对诱导痰上清液中MIP1α、MIF、MCP1的浓度进行测定，试验具体步骤完全按照生物公司所推荐的路线进行。14统计学分析采用612版本的SAS软件进行统计分析，数据以±s表示，两组间比较采用两样本t检验，相关性分析采用person相关分析。2结果21两组诱导痰炎症细胞相对计数构成比哮喘组诱导痰嗜酸粒细胞、淋巴细胞相对计数构成比均较正常组高(t=1139，P

4、t=565，P001)，具有统计学意义。哮喘组诱导痰肺泡巨噬细胞相对计数构成比较正常组低(t=439，P001)。中性粒细胞计数在两组间无差异。见表1。表1两组诱导痰炎症细胞相对计数构成比（略）与正常组比较，1)P2）P0.0522上清液中MIP1α、MIF、MCP1的质量浓度哮喘患者诱导痰上清液中MIP1α的浓度明显高于正常人(t=176，P005)，而哮喘患者诱导痰上清液MIF、MCPl浓度比正常人高，但无统计学意义(t=085，Pt=128，P005)。见表2。表2两组上清液中MIP1α、MIF、MCP1的质量浓度（略）与正常组比较，1)P2)P0.0523上清液MIP1α、MIF、

5、MCP1与诱导痰炎症细胞的相关性分析哮喘患者诱导痰上清液MIF与嗜酸粒细胞相对计数构成比呈正相关(r＝053，P005)，与淋巴细胞、肺泡巨噬细胞及中性粒细胞相对计数构成比无相关关系；哮喘患者诱导痰上清液中MIP1α、MCP1与肺泡巨噬细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞相对计数构成比均无相关关系。3讨论诱导痰技术在支气管哮喘的基础研究和临床应用中已受到越来越多的重视。大量研究证实诱导痰技术是一种无创、安全有效的检验方法，不仅为研究气道炎症的细胞和分子生物学机制提供了一种简便易行的方法，而且可以将气道炎症与肺功能检查、临床症状及治疗作用联系起来，对研究哮喘的发病机制、治疗效果及预后具有重

6、要意义。多数研究者采用的高渗盐水浓度均不超过7％，一般在3％~5％，该浓度对健康受试者或有气道炎症反应者一般不致于引起哮喘急性发作。本实验采用3％高渗盐水雾化吸入，除1例患者在痰诱导10min后出现喘息症状(立即给予沙丁胺醇雾化吸入后好转)外，其他受试者均能耐受30min痰液诱导检查，提示3％高渗盐水雾化吸入相对浓度较低，临床应用是安全、有效的。本研究结果还显示，哮喘患者诱导痰中嗜酸粒细胞、淋巴细胞相对计数构成比均较正常组高，与文献［45］报道一致。嗜酸粒细胞在哮喘发病中起着重要作用，不仅可以分泌多种细胞因子、炎症介质和粘附分子等，还通过表达多种Ig受体、细胞因子受体和粘附分子受体与相应配

7、体结合参与慢性气道炎症的发生、发展。淋巴细胞尽管数量有限，但在气道慢性反应中特别是免疫应答过程中起着不可替代的作用，在参与哮喘气道炎症的嗜酸粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞三种主要的效应细胞中，T淋巴细胞具有中枢性调节作用，本研究结果进一步证实气道内淋巴细胞增高是哮喘气道炎症持续存在的炎性细胞之―。肺泡巨噬细胞是一种具有多种功能的细胞，参与抗原递呈和加工，启动气道和肺组织局部的特异性免疫应答，而且能够分泌细胞因子、炎性介质及