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1、Graves’病患者血清中IFN论文【关键词】白细胞介素【Abstract】AIM:Toinvestigatetherelationshipbetinterferonγ(IFNγ),interleukin4(IL4)andinterleukin18(IL18)levels,andtheimmunopathogenesisofGraves’disease(GD).METHODS:TheserumlevelsofIFNγ,IL4andIL18easuredbyEnzymelinkedimmunosorbentassays(ELISA)inthree
2、groups:40netheabovementioned40patients,alizedafterorallytakingmethimazoleandin30healthyindividuals.RESULTS:TheserumIFNγ,IL4andIL18levelsofthe40nealizedGDpatientsIL4levelobviouslyincreased(P0.01)andtheserumIL18leveldecreased(P0.05),butnostatisticaldifference(P0.05)intheIFNγle
3、velethimazole.Inparisonalgroup,theratiosofserumIFNγ/IL4significantlyincreasedintheneethimazole(P0.01).Thepositivecorrelationsbetoftheneethimazole(r=0.601,0.535,P0.05),andthenegativecorrelationbetethimazole(r=-0.678,-0.626,P0.05)ayplaysomeimportantrolesintheimmunopathogenesis
4、ofGD.Attheonset,GDispredominatedbyTh1cellsandtheimmunereactiondriftstoethimazole.【Keyura等［2］报道从中毒性休克的小鼠肝脏克隆到了一种由应激诱生的蛋白，最初命名为IFNγ诱生因子(IGIF)或IL1γ，可以显著刺激Th1细胞产生IFNγ，Miyauchis等［3］发现IL18与GD有关，有可能参与对Th1/Th2细胞之间漂移的调节，但国内少见IL18在GD中的报道.本研究通过测定GD患者抗甲状腺药物治疗前后血清IFNγ,IL4和IL18水平，比较分析治疗前后
5、血清IFNγ/IL4比值，试图了解GD发生及发展中Th1/Th2细胞平衡的漂移，以及IL18对IFNγ和Th1/Th2细胞失衡的影响.1对象和方法1.1对象初发GD组：GD患者40（男12，女28)例，平均年龄(38±10)岁，范围21~50岁.有典型的GD症状和体征，均经血清TT3,TT4,TSH及甲状腺吸碘率测定诊断，并且血中促甲状腺素受体抗体（TRAb）阳性.排除肿瘤及其他自身免疫性疾病，未用抗甲状腺药物治疗.治疗GD组：初发组中成功随访38（男11，女27)例，平均年龄(38±9)岁，范围20~49岁.均用他巴唑治疗，患者高代谢症状完全
6、消失，血清中TT3,TT4和TSH水平恢复正常，即留取血清标本，平均疗程1~3mo，治疗期间未服用免疫抑制剂及糖皮质激素.正常对照组：健康志愿者30（男10，女20)例,平均年龄(36±8)岁，范围22~48.无甲状腺疾病及其他自身免疫性疾病.1.2方法全部受试者均于清晨空腹采外周静脉血10mL，标本低温离心后取血清3mL，将血清置放于-20℃冰箱保存备用.IFNγ,IL4和IL18药盒均购自法国DIACLONE公司，药盒最小检出量IFNγ5ng/L,IL40.5ng/L，IL1845ng/L.操作过程：用稀释液配制IL18的2000ng/L浓
7、度，然后作倍比稀释，6个标准浓度为2000,1000,500,250,125和62.5ng/L,分别取100μL加入到已用抗IL18mAb包被的微孔板内，同时将标本100μL也加入到相应的微孔板内，再加标准稀释液100μL，用塑料粘纸封住微孔板，室温孵育2h，洗涤3次，加100μL辣根过氧化物酶（HRP）标记的多克隆抗IL18抗体100μL，室温孵育30min，洗3次，加入H2O2TMB底物溶液100μL，室温孵育30min，最后加100μL2mol/LH2SO4终止反应.在波长450nm处测定A值，求出标准曲线，计算出样品的含量.IL4的6个
8、标准浓度为35.0,17.5,8.75,4.4,2.1和1.0ng/L，IFNγ的6个标准浓度为400,200,100,50,25及12.5ng/L，
