不同储存期毛橘红黄酮类物质含量变化的研究论文

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1、不同储存期毛橘红黄酮类物质含量变化的研究论文庄满贤，陈地灵，陈永刚，林励【摘要】目的研究储存期对毛橘红黄酮类物质含量的影响，为毛橘红有效储存期的确立提供依据。方法取毛橘红样品3批，在室温条件下贮藏放置，分别于第0、1、2、3、6、9、12个月时取样，用紫外分光光度法测定其总黄酮的含量.freelonthsunderroomtemperatureinthebeginningpoint、1st、2nd、3rd、6th、9th、12thmonthinedbyultravioletvisibleabsor

2、ptionspectroscopy,andthecontentsofnaringinandrhoifolininedbyHPLC.ResultsThecontentsoftotalflavonoids，naringinandrhoifolinofCitriGrandisaresteadyinoneyear.ConclusionThestorageperiodofCitriGrandisistentativelysetforoneyear.Keyentosa’，明代万历年间的《高州府志》“物产”部分载

3、有“化州橘红为化州独有”。黄酮类成分是毛橘红的主要有效成分之一1，柚皮苷和野漆树苷含量较高。本试验研究不同储存时间对毛橘红黄酮类物质含量的影响，为药材有效储存期的确定提供参考依据。1仪器、试药与样品1.1仪器8453E型紫外可见分光光度计(美国Agilent);P680A型高效液相色谱仪，带自动进样器、二极管阵列检测器及柱温箱(德国Dionex);BP211D型电子分析天平(德国Sartorius公司，0.01mg);KQ500型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，功率500A公司)，水为双蒸水

4、，其余试剂均为分析纯。1.3样品3批毛橘红药材均采自于广东省化州市，经广州中医药大学中药学院林励研究员鉴定，其原植物为化州柚Citrusgrandis‘Tomentosa’，样品来源见表1。表1毛橘红样品2方法与结果采用常温留样观察法，自2007年7月起，分别于第0、1、2、3、6、9、12个月取样品，测定其总黄酮、柚皮苷和野漆树苷含量。2.1总黄酮含量测定22.1.1供试品溶液的制备3取各样品粉末(过四号筛)0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加石油醚(60～90℃)50mL，超声提取45min

5、，弃去石油醚液，挥干样品中残存的石油醚，精密加甲醇50mL，称定，超声提取30min，取出，放凉，用甲醇补足减失的重量，过滤，即得。2.1.2柚皮苷对照品溶液的制备精密称取经110℃干燥至恒重的柚皮苷对照品5.06mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇匀，即得。2.1.3标准曲线的绘制分别精密量取柚皮苷对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL至25mL量瓶中，然后分别加入10%硝酸铝溶液1mL，加甲醇至刻度，摇匀，放置15min。另取10%硝酸铝溶液1mL置25mL量瓶中，加甲醇至

6、刻度，作为空白对照溶液，采用紫外分光光度法于306nm处测定吸光度，以质量浓度(ρ)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，得回归方程为：A=34.846ρ+0.0435(r=0.9991)，柚皮苷质量浓度在0.00397～0.01984mg·mL-1范围内线性关系良好。2.1.4精密度试验取柚皮苷对照品溶液，连续测定5次，吸光度RSD为0.22%，表明仪器精密度良好。2.1.5重复性试验精密称取2号样品0.05g，平行5份，按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，测定总黄酮含量。结果显示，总黄酮含量的平均

7、值为114.7mg·g-1，RSD为0.78%，表明该方法的重复性较好。2.1.6稳定性试验取1号供试品溶液，分别在0、15、30、45、60、90min时测定总黄酮吸光度，结果其RSD为1.79%，表明供试品溶液在90min内稳定性良好。2.1.7加样回收率试验精密称取2号样品适量,平行5份，以加入法进行试验，计算回收率，结果见表2。表2总黄酮加样回收率试验2.1.8样品含量测定分别取在室温条件下贮藏0、1、2、3、6、9、12个月的3批毛橘红果样品，精密称定，按“2.1.1”项下方法制备供试品溶

8、液，依法测定，计算其总黄酮含量，结果见表5。2.2柚皮苷含量测定32.2.1色谱条件色谱柱：KromasilODS柱(250mm×4.6mm，5μm);流动相：甲醇水36%乙酸(体积比49∶51∶4)，流速：1.0mL·min-1;柱温：室温;检测波长：283nm。以柚皮苷计，理论塔板数应不低于2500，见图1。2.2.2供试品溶液的制备同“2.1.1”项下方法。2.2.3对照品溶液的制备精密称取柚皮苷对照品5.06mg于25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，0