银杏黄酮磷脂复合物对大鼠心肌再灌注血管内皮损伤的保护作用

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1、银杏黄酮磷脂复合物对大鼠心肌再灌注血管内皮损伤的保护作用【摘要】目的：探讨银杏黄酮磷脂复合物对大鼠心肌缺血再灌注血管内皮损伤的保护作用。方法：健康DA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：银杏黄酮磷脂复合物对心肌缺血30min再灌注120min大鼠，可明显降低血清NO及MDA含量，而使SOD活性增强，亦使血浆ET1、TXA2水平下降，PGI2水平及PGI2/TXA2比值明显增高，且变化较银杏黄酮显著。结论：银杏黄酮磷脂复合物对大鼠心肌再灌注血管内皮损伤具有明显的保护作用，可能与其增强抗氧化酶活性，减少自由基对

2、内皮细胞的氧化损伤，减少内源性血管活性物质ET1释放，纠正PGI2／TXA2失衡等机制有关。【关键词】银杏黄酮；银杏黄酮磷脂复合物；心肌缺血再灌注损伤；自由基银杏黄酮(flavonoids)系银杏叶中提取的有效成分，具有舒张血管、扩张微循环口径、保护血管内皮、改善血流灌注等作用。临床上主要用于冠心病、心绞痛、脑血管疾患、脑损伤后遗症等的治疗。银杏黄酮磷脂复合物是将银杏黄酮与磷脂在一定条件下反应制得的一类物质，它的理化性质较银杏黄酮有很大变化，而且磷脂是生物膜的重要组成部分，从而使磷脂复合物的生物性质有了很大改善，大

3、大提高了银杏黄酮的生物利用度。本研究采用大鼠复制心肌缺血再灌注损伤模型，观察银杏黄酮磷脂复合物对缺血再灌注心肌内皮损伤保护方面的影响，探讨其心血管药理作用，以期为该药的临床应用提供基础的药理学资料。1材料与方法1动物健康DA）及超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒，由南京建成生物工程研究所提供；内皮素(ET)放免药盒、6-酮前列腺素Flα(6-Keto-PGF1α)放免药盒及血栓素B2(TXB2)放免药盒由解放军总医院科技开发中心放免研究所（原北京东亚免疫技术研究所）提供。1.3主要仪器BL-420F生物技能实验系统

4、，成都泰盟科技有限公司；DH-150型动物人工呼吸机,浙江大学医学仪器厂；紫外可见分光光度计，上海尤尼柯仪器有限公司；磁力搅拌器，深圳天南海北实业有限公司；恒温水浴箱，江苏省金坛市大地自动化仪器厂。1.4试验方法1.4.1药品制备银杏黄酮溶于丙酮中→加温至60℃→按1:1摩尔比加入大豆磷脂搅拌成溶液状态→过滤，收集滤液-减压除去反应溶剂→加入适量氯仿，充分溶解其中的磷脂复合物→过滤，收集滤液→减压蒸馏将氯仿蒸干，60℃真空干燥24h，收集固体，为黄褐色粉末，置干燥器中保存。1.4.2分组与给药实验前先进行动物筛选，

5、心电图检查无异常者进入实验。将40只大鼠随机分成4组，每组10只。在造模前，每日灌胃1次，共灌胃14d。其中第1组（假手术组）与第2组（模型组）灌胃生理盐水2ml；第3组（银杏黄酮组）：灌胃银杏黄酮生理盐水混悬液（按银杏黄酮0.079g/kg）2ml；第4组（银杏黄酮磷脂复合物组）：灌胃银杏黄酮磷脂复合物生理盐水混悬液（按银杏黄酮磷脂复合物0.237g/kg，其中含银杏黄酮0.079g/kg）2ml。第14天灌胃后1h开始造模，除假手术组只穿线不结扎外，其余各组均结扎30min,再灌注120min。1.4.3造模大

6、鼠冠脉结扎按各组大鼠血清中NO、MDA、SOD含量比较结果见表2。表1药物对缺血再灌注大鼠血浆ET1、PGI2及TXA2水平的影响注：*与假手术组比较P<0.01,#与模型组比较P<0.05,**与模型组比较P<0.01,△与银杏黄酮组比较P<0.05。表2药物对缺血再灌注大鼠血清NO、MDA及SOD水平的影响注：*与假手术组比较P<0.01,#与模型组比较P<0.05,**与模型组比较P<0.05,△与银杏黄酮组比较P<0.05。从表2可见，模型组各项指标与假手术组

7、比较，均有显著差异(P<0.01)，表明缺血再灌注后自由基生成明显增多，而自由基清除剂却明显减少。两药物组各项指标与模型组相比，也有明显差异(分别为P<0.05,P<0.05),说明预先给予大鼠药物干预后可减少体内自由基的生成，增强自由基清除剂的活性，从而减少自由基对血管内皮的损伤。而两药物组之间比较，亦有明显差异（P<0.05），说明银杏黄酮磷脂复合物减少自由基生成，增强抗氧化酶活性的作用要比银杏黄酮强，从而说明其保护血管内皮的作用更好。3讨论银杏黄酮是银杏叶提取物中的有效成分，抗氧化作用

8、显著，可以舒张血管、扩张微循环口径、改善血流灌注等，其广泛的心血管药理作用早已被人们所认识。而银杏黄酮磷脂复合物是将银杏黄酮与磷脂在一定条件下反应制得的一种新型制剂，除具有与银杏黄酮相似的药理作用外，还因为其水、脂溶性好，生物利用度高等特性，而日益受到人们的广泛关注，成为当今心血管领域中研究的热门话题。本研究正是采用大鼠复制心肌缺血再灌注损伤模型，探讨银杏黄