银杏黄酮磷脂复合物对大鼠心肌再灌注血管内皮损伤的保护作用论文

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1、银杏黄酮磷脂复合物对大鼠心肌再灌注血管内皮损伤的保护作用论文【摘要】目的:探讨银杏黄酮磷脂复合物对大鼠心肌缺血再灌注血管内皮损伤的保护作用。方法:健康DA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:银杏黄酮磷脂复合物对心肌缺血30min再灌注120min大鼠,可明显降低血清NO及MDA含量,而使SOD活性增强,亦使血浆ET1、TXA2水平下降,PGI2水平及PGI2/TXA2比值明显增高.freell;第3组(银杏黄酮组):灌胃银杏黄酮生理盐水混悬液(按银杏黄酮0.079g/kg)2ml;第4组

2、(银杏黄酮磷脂复合物组):灌胃银杏黄酮磷脂复合物生理盐水混悬液(按银杏黄酮磷脂复合物0.237g/kg,其中含银杏黄酮0.079g/kg)2ml。第14天灌胃后1h开始造模,除假手术组只穿线不结扎外,其余各组均结扎30min,再灌注120min。1.4.3造模大鼠冠脉结扎按文献[1]方法稍加改进。于最后一次灌胃1h后,3%戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔麻醉,仰卧位固定,接BL-420F生物技能实验系统,用标准肢体二导连记录心电图。颈部去毛,切开皮肤,分离颈前肌,暴露气管,行气管插管。插管另端接

3、于动物人工呼吸机行正压呼吸(呼吸比1:2,呼吸频率60次/min,潮气量13mL/kg)。胸部去毛、消毒,距胸骨左侧旁0.5cm处第3、4肋骨表面纵行切开皮肤及皮下组织约2cm,血管钳夹闭肋间外肌及小血管,小弯镊分别从第3、4肋两侧肋间隙穿过夹回结扎线,扎紧肋间动脉,剪断第3、4肋骨后向左右两侧轻拉,打开胸膜和心包。以左冠状动脉主干为标志,在左心耳根部下方2mm处进针,除假手术组仅穿线不结扎外,其余各组均以3/0丝线穿过左冠状动脉下方的心肌表层在肺动脉圆锥旁出针,待心电图恢复稳定10min后,结

4、扎左冠状动脉左前降支,结扎时将硅胶管置于结扎线与血管之间,使硅胶管压迫引起冠脉闭塞。结扎前、后及再通记录Ⅱ导联心电图,以结扎部位以下心肌变苍白、搏动减弱且心电图ST段弓背向上抬高达0.1mv或T波高耸,QRS波波形宽大畸形为结扎成功的标志;解开结扎线后QRS波振幅逐渐回落,抬高的ST段回落,缺血区颜色恢复为再通成功的标志。缺血30min,再灌注120min,心脏采血。采血共分3部分,第1部分取血2ml注入含10%EDTA-Na230ul和抑肽酶40ul的离心管中混匀,4℃3000rpm离心10m

5、in,分离血浆,放-20℃保存,用于检测ET1;第2部分取一次性5ml空针吸取消炎痛-EDTA.Na2液约0.3ml,取血4ml,即刻在空针内颠倒混匀,沿试管壁缓慢注入离心管内,4℃离心3500rpm,15min,分离血浆,放-20℃保存,用于检测PGI2和TXA2;第3部分取一次性5ml空针取血3ml,注入试管中静置30min,2500rpm,15min,分离血清,放-20℃保存,用于检测NO、MDA和SOD。1.4.4检测指标和方法用放射免疫分析法[2]测定血浆内皮素(ET1)、前列环素(P

6、GI2)和血栓素A2(TXA2)的代谢产物6酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)和TXB2水平;血清NO、SOD、MDA含量严格按试剂盒说明书操作测定。测定工作在潍坊医学院药理学实验室和潍坊医学院附属医院完成。1.5统计学处理所有数据采用均数±标准差(x±s)表示。采用SPSS13.0软件进行统计学分析,经方差齐性检验和正态性检验后,进行单因素方差分析,组间均数差异比较采用q检验。以P0.05为差异有统计学意义。2结果各组大鼠血浆中ET1、PGI2、TXA2含量及PGI2/TXA2比值比

7、较结果见表1。从表1可见,模型组各项指标与假手术组比较,均有显著差异(P0.01),表明缺血再灌注后血浆中缩血管物质明显升高,而扩血管物质明显降低,PGI2与TXA2的比例失调,造模成功。两药物组各项指标与模型组相比,亦有显著差异(分别为P0.05,P0.01),表明对大鼠预先给予药物干预后,可明显改善缩血管与扩血管物质的比例失衡,从而达到保护血管内皮的功能,而两药物组之间,亦有明显差异(P0.05),表明银杏黄酮磷脂复合物对改善这种比例失衡的作用要比银杏黄酮更强,保护血管内皮的作用更好。各组大

8、鼠血清中NO、MDA、SOD含量比较结果见表2。表1药物对缺血再灌注大鼠血浆ET1、PGI2及TXA2水平的影响注:*与假手术组比较P0.01,#与模型组比较P0.05,**与模型组比较P0.01,△与银杏黄酮组比较P0.05。表2药物对缺血再灌注大鼠血清NO、MDA及SOD水平的影响注:*与假手术组比较P0.01,#与模型组比较P0.05,.freelRNA的表达,从而减少NO的生成。与模型组相比,再灌注前分别给予银杏黄酮、银杏黄酮磷脂复合物均可降低再灌注后血浆中的ET1、TXA2含量,并都明

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