ball患者胸腺输出tcr vβ亚家族nave t细胞分析

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1、BALL患者胸腺输出TCRVβ亚家族naveT细胞分析【摘要】目的了解B细胞急性淋巴细胞白血病（BALL）患者外周血T细胞中TCRVβ亚家族23种信号T细胞受体删除DNA环（sjTRECs）的存在情况，从而了解胸腺近期输出各TCRVβ亚家族naveT细胞的功能。方法利用半巢式PCR分别扩增10例BALL患者外周血单个核细胞DNA中的23种Vβ～Dβ1sjTRECs，10例正常人作为对照。结果TCRVβ亚家族sjTRECs在大部分正常人和部分BALL患者中均可检测到，与正常人比较，BALL病人的Vβ24～Dβ1sjTRECs

2、出现频率比正常人高，且有统计学意义（80%∶30%,P=0.0285），另有18个家族的Vβ～Dβ1sjTRECs比正常人低，其中在Vβ1（30%,P=0.0285）、Vβ12（20%,P=0.0285）、Vβ13（40%,P=0.0043）、Vβ15（20%,P=0.0022）和Vβ18（20%,P=0.0089）5个亚家族sjTRECs出现频率的差异有统计学意义。结论BALL病人胸腺输出大多数Vβ亚家族naveT细胞功能低于正常人。【关键词】急性淋巴细胞白血病T细胞受体删除DNA环胸腺近期输出功能0引言白血病患者常伴有细胞免疫功能

3、缺陷，既往的研究多数仅了解病人的外周血中所表现的细胞免疫状态，而未能更好地了解其胸腺功能情况。自从1998年Douek等首次报道通过定量检测外周血中T细胞受体删除DNA环（TcellreceptorexcisionDNAcircles,TRECs或称sjTRECs）从而检测胸腺近期的输出功能后，sjTRECs被用来作为测量近期胸腺输出的敏感指标，应用于多种免疫缺陷性疾病等的检测[13]。我们的前期研究报道了正常人和白血病患者外周血中sjTRECs的定量检测情况[4,5]。对δRecψJαsjTRECs分析仅代表了总的胸腺近期输出功能

4、，而不能具体到各亚家族的sjTRECs的情况。本研究在建立了对TCRVβ亚家族sjTRECs检测的基础上，分析B细胞-急性淋巴细胞白血病（BALL）患者Vβ亚家族naveT细胞的近期胸腺输出情况。1资料与方法1.1资料经细胞形态学和细胞组化，按FAB分型确诊的表1用于PCR和半巢式PCR的引物序列及半巢式PCR产物引物序列作用半巢式PCR产物（bp）Vβ1Y15’ccggagtgaggagggacagtgcagaggtg3’下游引物556bpVβ2Y15’gcacacacactcccagatgtctcagtcaggaaagc3’下

5、游引物400bpVβ3Y15’catcggagccagcaccagccctgagttag3’下游引物345bpVβ4Y15’atacccatgcccacccacaaacacagaaacag3’下游引物419bpVβ5Y15’ttttccccagccctgagttgcagaaagcccc3’下游引物431bpVβ6Y15’gccacgattgcttccaccacccacatttacag3’下游引物472bpVβ7Y15’ggcagagtcacactcaggcaaaaggaaaccc3下游引物469bpVβ8Y15’gcagccc

6、ttctcaagagcccccaccattc3’下游引物596bpVβ9Y15’gtgccacacagaaagaaaagaaagagcttccc3’下游引物592bpVβ10Y15’cgtagtgcctaccaacctgctacacacttatttcc3’下游引物339bpVβ11Y15’ggcaagatgtcctcacattagaggcgaccctttc3’下游引物321bpVβ12Y15’agttggtctgagactggggtaggaatggacg3’下游引物452bpVβ13Y15’gcaacaaaggagacatctg

7、aggacctgggacc3’下游引物490bpVβ14Y15’cagtgagcttgtcctgcccaactttgaaacc3’下游引物499bpVβ15Y15’ctaaacaccccacatcccacaacccacatcc3’下游引物362bpVβ16Y15’cctcacagtcagagtcacaaacctttcagagcag3’下游引物585bpVβ17Y15’cgtttcctgccatcatagagtgcagaggagccctgt3’下游引物357bpVβ18Y15’tcctacaatcctcccctatttccaccc

8、tcaac3’下游引物416bpVβ19Y15’ctcccttccagcctaatacatcacctgcttcc3’下游引物343bpVβ21Y15’tgagcccagatcgcaccac