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时间:2018-11-20
《骨髓间充质干细胞及其复合物对肌腱早期愈合影响的实验研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、骨髓间充质干细胞及其复合物对肌腱早期愈合影响的实验研究.L.编辑。作者:韩桂全,唐述森,刘晓伟,韩振学,李志仙【摘要】[目的]探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)与纤维蛋白胶复合体对兔肌腱早期愈合的影响,为临床应用提供依据。[方法]家兔骨髓间充质干细胞离体培养、纯化、扩增后与纤维蛋白胶混合。36只家兔分为实验组和对照组,兔跟腱横断制作肌腱断裂模型。实验组应用自体BMSCs复合纤维蛋白胶移植于肌腱损伤区,对照组仅以纤维蛋白胶置于肌腱损伤区。分别于术后1周,3周,6周及12周对移植部位进行大体标本观察,细
2、胞示踪、组织学检查、免疫组织化学检查、形态测定分析及生物力学测定。[结果]实验组相比对照组肌腱大体观察粘连差,肌腱活动性好。3周后纤维蛋白载体即降解,细胞示踪结果显示标记的骨髓间充质干细胞至少6周内仍可保持活性并存在于肌腱组织中,但之后逐渐扩散。3周时,实验组与对照组相比胶原纤维排列更为有序,且胞核形态结构更规则,但在6周及12周时,实验组与对照组胞核参数测定无统计学意义。3周时实验组比对照组具有更强的的生物力学特性,但之后则差别不明显。[结论]肌腱损伤后即给以腱内BMSCs复合纤维蛋白胶治疗可促进
3、肌腱愈合早期组织形态学及生物力学修复。【关键词】骨髓间充质干细胞;肌腱;愈合Abstract:[Objective]ToinvestigatetheeffectofrabbitBMSCsplified.Therabbitsental(E)andcontrol(C)groups.Theinjurymodelidsubstanceoftheachillestendon.Theexperimentalgroupplantedensorphology,celltracing,histologicalasse
4、ssment,immunohistochemistrystudies,morphometricanalysis,andmechanicaltesting.[Results]Thegrossmorphologyofthetendonsshoentalgrouphadlesseradhesionandbetterreactivenessthanthatinthecontrolgroup.Thefibrinhaddegradedat3arroesenchymalstemcellsremainedviabl
5、eandpresentedintheintratendinousregionforatleast6orediffuseatlatertimepoints.At3oreorganizedandthereorphometricnuclearparametersinthetreatmentgroup.At6and12orphometricnuclearparameters.Biomechanicaltestingshoprovedmodulusinthetreatmentgroupasparedepoin
6、t.[Conclusion]Intratendinouscelltherapyarroesenchymalstemcellsfolloarytendonrepaircanimprovehistologicalandbiomechanicalparametersintheearlystageoftendon-healing.Keyesenchymalstemcells;tendons;healing肌腱损伤是外科的常见问题之一,其修复是一个复杂的过程,关键在于损伤后的修复不仅要达到肌腱纤维连续性及强度
7、的修复,而且要使肌腱与其周围组织的活动性达到良好,关节功能得以恢复。肌腱损伤术后大多需要外固定,由于不能早期恢复功能锻炼,使肌腱愈合面临很大风险,例如肌腱粘连及肌腱断裂。本研究应用自体骨髓间充质干细胞(bonemesenchymalstemcells,BMSCs)与纤维蛋白胶复合体修复家兔肌腱损伤,观察其对肌腱早期愈合的影响,为临床应用提供理论依据。1材料与方法1.1实验对象健康家兔(潍坊医学院动物中心提供)36只,体重1.5~2.5kg,无感染、瘢痕和皮肤撕裂等情况。1.2BMSCs的培养:将家兔
8、以3%戊巴比妥钠经耳缘静脉常规麻醉,取20ml注射器经胫骨近端内侧进针,缓慢抽取骨髓1~3ml,以贴壁法分离、培养BMSCs,常规消化传代。1.3BMSCs胞浆标记:按照厂家说明用CFDA-SE(荧光胺反应琥柏酰亚胺酯)示踪细胞。第三代BMSCs细胞在PBS中清洗,在10-μmol/LCFDA-PBS溶液中再次悬浮,然后37℃下孵育10min。于37℃下在完全培养基中悬浮30min,确保探针完全修饰。1.4实验分组:将36只家兔分为实验组和对照组,每组18只。切开家兔
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