k562和k562-ao2细胞hla i 类分子与mica-b的表达及其对nk细胞杀伤活性的影响论文

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1、K562和K562/AO2细胞HLAI类分子与MICA/B的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响论文梅家转牛新清郭坤元周健魏红梅【摘要】本研究探讨K562亲本细胞株及多药耐药细胞株K562/AO2细胞表面HLAI类分子和MHCI类链相关分子（MICA/B）的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。用流式细胞仪检测K562和K562/AO2细胞株HLAI类分子和MICA/B的表达情况；LDH释放法测定3例健康人NK细胞在不同效靶比时对K562和K562/AO2细胞的杀伤活性；效靶比10∶1时，用抗HLAI类分子单克隆抗体（ICA/B单克隆抗

2、体（BAMO1）分别封闭MHCⅠ类分子和MICA/B，观察NK细胞杀伤K562及K562/AO2细胞活性的变化。结果表明：K562和K562/AO2细胞均不表达HLAI类分子，K562细胞的MICA/B表达较K562/AO2明显增高（P0.01）。效靶比5∶1、10∶1、20∶1、30∶1时NK细胞杀伤K562和K562/AO2细胞的活性分别为(29.32±0.12)%、(45.33±0.78)%、(58.37±0.87)%、(72.37±0.96)和(12.47±0.91)%、(24.36±1.11)%、(33.29±1.0

3、3)%、(53.87±1.27)%，各效靶比时NK细胞对K562细胞的杀伤活性较K562/AO2细胞明显增强（P=0.000）；效靶比10∶1时O1能明显抑制NK细胞杀伤K562和K562/AO2细胞的活性。结论：MICA/B在K562和K562/AO2细胞表达的差异与NK细胞的杀伤活性有关；NK细胞对K562/AO2细胞杀伤活性降低与HLAI类分子无关；MICA/B在多药耐药肿瘤细胞的低表达导致耐药肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性下降。【关键词】自然杀伤细胞;MHCI类链相关分子A/B;K562细胞ExpressionofHLA

4、ClassIMoleculesandMHCClassIChainrelatedMoleculesA/BinK562andK562/AO2CellLinesandTheirEffectsonCytotoxicityofNKCellsAbstractThestudyedtoinvestigatetheexpressionofHLAclassImoleculesandMHCclassIchainrelatedmoleculesA/B(MICA/MICB)inK562andadriamycin(ADM)resistantK562c

5、elllines(K562/AO2)andtheireffectoncytotoxicityofNKcells.ExpressionofHLAclassImoleculesandMICA/MICBonthesurfaceofK562andK562/AO2celllinesetry.CytotoxicityofNKcells(isolatedfrom3healthypersons)againstK562andK562/AO2cellsents,antiMHCclassImonoclonalantibody(McAb)(HCcla

6、ssIchainrelatedmoleculesMcAb(BAMO1,specificlyagainstMICAandMICB)oleculesonK562oleculesentsconfirmedthatatE∶Tof10∶1killingofNKcellsagainstK562andK562/AO2cellsoleculesonK562andK562/AO2cellsiscorrelatedediatedlysis.NKcellsdisplayhighercytotoxicityagainstparentalK562ce

7、llsthanmultidrugresistantK562/AO2cells.DoultidrugresistanttumorcelllinesleadstoreductionofsusceptibilitytoNKlysis.Keymol/LEDTA）为MiltenyiBiotec公司产品，CD56MicroBeads为MiltenyiBiotec公司产品，抗MICA/MICB单克隆抗体(BAMO1,IgG1)由德国AlexanderSteinle教授惠赠，FITC标记的鼠抗人HLAI类分子单克隆抗体（I1640为Gib

8、co公司产品，淋巴细胞分离液购于上海试剂二厂，rhIL2购于上海华新公司，NK细胞杀伤活性检测试剂盒(Cytotox96NonRadioactiveCytotoxocityAssay）为Promega公司产品，流式细胞仪为Coulter公司产品。K562细胞