胰腺癌组织中tgf论文

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1、胰腺癌组织中TGF论文曾水林,陆澄,杨鹏,朱建宝,刘培党,李涛摘要目的:探讨胰腺癌组织中TGFα及EGFR的表达与胰腺癌神经浸润的关系。方法:用免疫组化方法检测31例胰腺癌及其对应癌旁组织中TGFα及EGFR蛋白表达情况,并对实验结果进行统计学分析。结果:31例胰腺癌组织中存在神经浸润者19例,EGFR、TGFα阳性表达分别为21例(67.74%)和18例(58.06%),与对应癌旁组织相比其表达的差异均具有统计学意义(P0.05)。在发生神经浸润的19例中,呈EGFR阳性表达16例(84.21%),TGFα阳性表达12例(63.16%),TGFα和EGFR共同阳性

2、表达12例(63.16%);无神经浸润者12例中,呈EGFR阳性表达5例(41.67%).freelalgroinggro,HE染色,封片,干燥后观察结果。经专业病理科医师在光学显微镜下进行形态学诊断(双盲法)后,将31例标本分为有肿瘤神经浸润和无肿瘤神经浸润两组。1.2.2免疫组化染色(ABC法)石蜡切片分为两套,分别行TGFα和EGFR抗体免疫组化染色。切片脱蜡水化,磷酸盐缓冲溶液(PBS)冲洗3min×3次;每张片子加1滴或50μl3%H2O2以阻断内源性过氧化物酶的活性,室温10min;PBS冲洗5min×3次;微波抗原修复;自然冷却,PBS冲洗,稍干;PB

3、S冲洗5min×3次;每张片子加1滴或50μl的2%正常马血清,室温30min;50μl一抗,37℃60min或4℃过夜;0.03%Tin×3次;50μl生物素标记二抗,37℃30min;0.03%Tin×3次;50μl亲和素生物素过氧化物酶复合物,37℃30min;0.03%Tin,PBS冲洗5min×2次;DAB成色,水洗15min;苏木素复染,自来水冲洗返蓝,1%盐酸乙醇脱色,自来水冲洗10min,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。1.3实验结果的判断用DAB显色,淡黄色、棕黄色或棕褐色颗粒均视为阳性结果。阳性细胞必须细胞结构清晰、阳性颗粒定位准确、着色

4、明显强于背景。参照Hirayama等5提出的阳性判断标准。EGFR和TGFα免疫组化阳性结果定位于胰腺癌细胞的胞浆和(或)胞膜中,EGFR表达以胞膜为主,TGFα则以胞浆为主,呈片状或散在分布。TGFα和EGFR共同表达:同一序号的石蜡标本连续切片,分别作EGFR和TGFα蛋白表达的免疫组化检测,如果在连续切片的两张片子中EGFR和TGFα蛋白均表达,则定义TGFα和EGFR在该标本中共同表达。PBS代替一抗作为阴性对照,阳性对照片由北京中山生物公司提供。1.4统计学处理采用SAS统计软件分析系统对全部数据进行统计处理,EGFR、TGFα表达与临床病理因素之间关系的

5、计数资料处理采用确切概率法,P0.05认为有显著性差异。2结果2.1HE染色结果HE染色显示,31例胰腺癌标本中组织学分级Ⅰ级者9例,Ⅱ级者11例,Ⅲ级者11。存在肿瘤神经浸润者19例,表现为神经周围间隙的完整性破坏,癌细胞浸润进入神经周围间隙、神经纤维沿神经周围间隙扩散或在神经外膜内发现癌细胞(图1);无肿瘤神经浸润者12例。未发现肿瘤神经浸润与肿瘤患者年龄、性别及肿瘤大小、部位、临床分期、组织学分级等存在统计学上的相关性。2.2免疫组化染色结果免疫组化染色显示,31例胰腺癌组织中,EGFR和TGFα阳性表达者分别为21例(67.74%)和18例(58.06%)(

6、图2、3);对应癌旁组织仅有少量、散在腺胞细胞浆着色,但着色细胞数5%,与胰腺癌组织比较有显著性差异(P0.05)。胰腺癌组织EGFR和TGFα共同表达14例,占31例病例总数45.16%,而对应癌旁组织的EGFR和TGFα共同表达为0,它们之间的差异具有统计学意义(P0.05)。另外,在邻近肿瘤的神经组织中也显示有TGFα强阳性表达(图图1胰腺癌神经浸润HE×4004)。EGFR、TGFα阳性表达与患者性别、年龄及肿瘤部位、大小、临床分期、组织学分级间均无关(P005)。在19例胰腺癌细胞神经浸润者中,EGFR和TGFα阳性表达分别为16例(84.21%)和12例

7、(6316%),TGFα和EGFR共同阳性表达12例(6316%)。无神经浸润者12例中,EGFR和TGFα阳性表达分别有5例(41.67%)和6例(50.00%),TGFα和EGFR共同阳性表达仅2例(16.67%)。有神经浸润者与无神经浸润者比较,差异具有统计学意义(P0.05)。3讨论浸润与转移是肿瘤的生物学特性之一。肿瘤浸润转移常见的途径是局部浸润、血道、淋巴道和种植转移。有研究表明,肿瘤还可以浸润周围神经,进入神经周围间隙并沿该间隙发生浸润转移,可见于胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、腮腺肿瘤、前列腺癌、头颈部基底细胞和鳞状细胞癌等,其中胰腺癌最为常见。而胰腺本

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