胰腺癌组织中神经生长因子受体的表达意义论文

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1、胰腺癌组织中神经生长因子受体的表达意义论文【摘要】目的：研究神经生长因子（NGF）高亲和受体TrkA与低亲和受体p75在胰腺癌中的表达意义.方法：应用实时定量PCR法检测56例胰腺癌组织中TrkA及p75的表达并进行临床病理及预后分析.结果：所有组织标本中均可检测出TrkA及p75的表达呈负相关.p75与TrkA的表达水平与患者的腹背部疼痛和神经浸润程度有关（P均0.05）.Cox单变量分析揭示，高p75表达患者较高TrkA患者的总生存时间延长（P0.05），Cox多变量分析揭示，p75及TrkA均为影响预后的独立因素.结论

2、：胰腺癌中TrkA的表达促进肿瘤的恶性进展，而p75则相反，NGF刺激增长或抑制胰腺癌的双重作用可能与TrkA及p75的表达比率相关.【关键词】胰腺肿瘤；受体，神经生长因子；TrkA；p750引言胰腺癌嗜神经浸润的生物学特征，是导致术后局部复发影响预后的主要原因之一［1-2］.研究发现.freelo，出现远处转移48例.所有患者术前按Zhu等［3］的方法结合视觉疼痛类比量表(visualanalogscales,VAS)评分以评价患者腹部、背部疼痛水平：0，无疼痛；1，轻微可以忍受的疼痛；2，中等程度疼痛，需要非吗啡类止痛药

3、物干预；3，严重的疼痛，需要吗啡类药物干预.1.2方法用Trizol法按操作说明从每例标本50mg胰腺癌组织中抽提总RNA.采用无RNA酶的DNA酶Ⅰ处理,以提高RNA纯度,并使用QiagenRNeasyKit进一步纯化总RNA,操作方法按说明进行.分光光度计测定总RNA的纯度,琼脂糖凝胶电泳初步评价总RNA质量,确保总RNA的A260/A280之值在1.8～2.0之间.琼脂糖凝胶电泳,18s和28s电泳条带清晰,.freelerpremier5.0软件,参照各靶基因序列设计引物（表1）,TBP(TATAboxbindi

4、ngprotein)备用作管家基因.每份标本取总RNA5μg,在逆转录酶SuperscriptⅡ(Invitrogen公司)作用下合成cDNA,加入引物1μL，荧光染料SybrGreenI0.5μL,总反应体积25μL,按InvitrogenRTPCRkit操作说明应用ABI7700进行PCR扩增,反应条件:50℃孵育2min,95℃10min,45个循环,95℃15s,60℃1min.统计学处理:采用SPSS13.0软件包,对年龄、性别、淋巴结转移、疼痛程度、肿瘤大小、神经浸润程度等可能影响中晚期胰腺癌预后的因素进行单

5、因素和多因素分析.两变量相关分析采用Spearman秩相关；两组间生存率曲线比较采用logrank法,多因素分析采用Cox比例风险回归模型,率的比较采用χ2检验,检验水平定为α=0.05.表1扩增靶基因的引物序列（略）2结果2.1TrkA及p75在胰腺癌中的分布TrkAmRNA的浓度为0.53±0.92（0.003～4.660），下四分位数为0.137而上四分位数为0.437；p75mRNA的浓度为0.95±1.58（0.001～6.660），下四分位数为0.142而上四分位数为0.548.2.2TrkA及p75表达与临床

6、病理的关系TrkA及p75基因表达水平均与疼痛及神经浸润有关（χ2检验）；TrkA与p75表达水平负相关（P0.05），TrkA，p75与疼痛，神经浸润程度有关（P0.05,表2）.表2TrkA和p75的表达与临床病理学指标的关系（略）2.3预后Cox单变量分析揭示高p75表达患者较高TrkA患者可延长总生存时间（设定所有病例的p75及TrkA表达量的上四分位数为高表达界值），TrkA（P=0.013），神经浸润（P=0.011），及疼痛（P=0.018）是预后不良的影响因素（图1），组织学分级，肿瘤大小，淋巴结转移不是预后

7、因素.在无病生存中p75（P=0.000）及疼痛（P=0.012）为预后因素；Cox多变量分析揭示，p75，TrkA，神经浸润和疼痛为影响总生存率的独立因素.A:TrkA高表达患者预后不良（P0.01）;B:p75高表达患者预后好（P0.01）.图1校准后TrkA和p75进行总生存率的KaplanMeier分析（略）3讨论NGF是一种多功能性、多肽性物质,它通过特异的靶细胞表面的神经生长因子受体(nervegroRNA，TrkAmRNA水平比正常胰腺组织增加2.7和5.6倍,NGF在癌细胞胞质中强表达,NGFmRNA和Tr

8、kAmRNA表达水平在有神经浸润的肿瘤中,比无神经浸润的高,且在高表达NGF和TrkA的肿瘤中,周围神经浸润更易发生,提示癌细胞释放的NGF并非通过旁分泌或自分泌作用于自身,而是与神经束膜上出现的TrkA相互作用,使神经与癌细胞相接触,导致TrkA介导的周围神经浸润，这和我们的结果一致.国