锌对微波致猪视网膜神经节细胞损伤的防护作用论文

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1、锌对微波致猪视网膜神经节细胞损伤的防护作用论文.freelDA）活性.结果微波辐照后.freelicroinethelipidperoxidationdamageintheprimaryculturedpigretinalganglioncellsinducedbymicroicroeexperimentfoundationforstudyofmechanismofmicroageanditsprotection.METHODSPigreti-nalganglioncellsDA）by2450MHzcontinuousachine.Themorphologicalvar

2、iationofcellsmediatelyafterradiationbyopticsmicroscopeandtrans-missionelectronicmicroscope.RESULTSAfterradiation，somecellscongregatedandtheiraxondisappeared.Mito-chondriaandendoplasmicreticulumissionelectronicmicroscope.ThecontentofMDAicroscope，butmitochondriasitochondriacristaebytransmi

3、ssioncouldbefoundunderelectronicmicroscopeicroagetoinvitrocul-turedretinalganglioncellsandzinccanimproveantioxidativecapacityofcells，andtosomeextentremedymicroageoflipidperoxidationtoretinaganglioncells.0引言近年来随着微波在工农业生产，医疗卫生，通讯，家用电器以及军事等领域的广泛应用，微波的医学防护受到极大的关注.微波的损伤是多方面的，其中眼睛是敏感的重要靶器官.研究表

4、明，微波可以对眼睛造成明显损害［1，2］，对机体的脂质过氧化过程有促进作用［3］，视网膜各层细胞内均有清除自由基的天然保护系统，包括抗过氧化物酶系统和天然的抗氧化剂［4］.SOD是机体内广泛存在的一种重要的抗氧化物酶，它能特异性歧化超氧阴离子自由基，保护细胞免受脂质过氧化的损伤，锌作为SOD的必要组分，对体内自由基和过氧化脂质的清除起重要作用.研究锌对微波致视网膜神经节细胞损伤的防护作用具有重要意义.1材料和方法1.1材料眼球来源于西安市肉联厂;木瓜蛋白酶（中科院上海生化所东风生化技术公司）;牛血清白蛋白（中国医学科学院血液学研究所）;DL-半胱氨酸，DMEM培养基（G

5、ibco公司）;小牛血清（杭州四季青生物工程公司）;YJ-875医用净化工作台（苏州净化仪器厂）;TE-HER式数字式CO2培养器（日本平泽制造厂）;EM培养液中，37℃，50mLL-1CO2孵箱培养.1.2.2辐照条件频率2450MHz连续波屏蔽室内辐照，室温19～20℃，相对湿度40%.细胞分为5组，分别为对照组（不受照射），30mDA测定:收集细胞，PBS漂洗2～3次，调整细胞浓度为106mL-1，超声粉碎，取100μL进行SOD（羟胺法［6］）和MDA（改良硫代巴比妥酸荧光法［7］）测定.统计学处理:SPSS软件进行t检验.2结果2.1光镜观察细胞培养3～5d后

6、，细胞贴壁，体积小，圆形，分散存在，有轴突伸展（Fig1）.微波辐照后，Ⅰ组细胞聚集成团，仍可见轴突，少数细胞散在，轴突消失，边缘较模糊，Ⅱ组细胞多数边界模糊，部分细胞漂浮，可见细胞碎片;Ⅲ组细胞与Ⅰ组无明显区别;Ⅳ组漂浮细胞少于Ⅱ组.2.2电镜观察正常细胞（对照组）核大，细胞质少，染色质分散均匀，可见线粒体和内质网.微波辐照后，Ⅰ组细胞线粒体肿胀明显，嵴断裂、消失，可见凋亡细胞（Fig2）;Ⅱ组细胞坏死较多，细胞膜破裂，核膜破裂，线粒体、内质网扩张产生空泡（Fig3）;Ⅲ组细胞线粒体轻度胀大，嵴完整，核染色质分散良好;Ⅳ组细胞呈现过渡状态，及染色质浓缩，但核膜，细胞膜

7、均完整.图1－图3略2.3MDA含量与SOD活性微波辐照后，MDA显著升高，且升高幅度与辐照强度呈一定的相关性，SOD活性降低.加锌组细胞MDA含量较辐照组明显下降，与对照组基本相近，SOD则呈现上升趋势，但未恢复到对照组水平（Tab1）.3讨论微波对视网膜损伤的研究报道较少，且多为组织病理学损伤［1，2］.表1各组每个细胞中MDA含量及SOD活性略我们以猪视网膜神经节细胞为对象研究微波辐照的损伤作用及其防护，结果表明:连续波辐照可导致体外培养的视网膜神经节细胞发生形态学变化.微波对神经节细胞形态学的影响最初表现为线粒体的损伤和神经轴突消