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时间:2018-11-20
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1、中药复方“通脉口服液”对肾小球系膜细胞增殖及分泌IL-1β的影响论文钟丹杨霓芝赵代鑫刘明平【摘要】目的观察中药复方“通脉口服液”对体外培养条件下大鼠肾小球系膜细胞(MsC)增殖和分泌IL-1β的影响。方法应用细胞培养技术进行肾小球系膜细胞的传代培养,采用血清药理学方法,制备通脉口服液含药血清、黄芪含药血清、三七含药血清,采用MTT法观察各组含药血清对正常培养条件下及LPS刺激状态下肾小球系膜细胞增殖的影响,ELISA法测定LPS刺激下通脉口服液组细胞上清中IL-1β的含量。结果3组含药血清均可抑制
2、大鼠肾小球系膜细胞的增殖,三组之间比较,通脉口服液组作用要优于黄芪组及三七组。ELISA结果表明:通脉口服液含药血清可以抑制肾小球系膜细胞分泌IL-1β。结论中药复方“通脉口服液”可抑制肾小球系膜细胞的增殖及LPS诱导的系膜细胞IL-1β的产生,肾小球系膜细胞是通脉口服液防治慢性肾炎.freelethodsGMCwereculturedwithinvitrocellculturetechnology.SerumcontainingTongmaiOralSolution(TM),Serumconta
3、iningHuangqiandSerumcontainingSanqiwerepreparedwithserumpharmacologicalmethods.Cellproliferationdetectedbymethylthiazolyltetrazolium(MTT)assayandIL-1βlevelbyenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)wereusedtoevaluatetheeffectofTM-containingserum,Huangqi-
4、containingserumandSanqi-containingserum.ResultsTM-containingserum,Huangqi-containingserumandSanqi-containingserumcouldinhibittheproliferationofmesangialcell,andtheinhibitoryeffectofTM-containingserumwasstronger.ProteinofIL-1βwasincreasedsignificantlyi
5、nthepresenceofLPSandthisincreasecouldbereversedbyTM-containingserum.ConclusionTheglomerularmesangialcellisoneofthemaintargetcellswhichtheTongmaiOralSolutionbringstherapeuticalactionandthemechanismsmayberelatedtoinhibitingthemesangialcellproliferation,
6、decreasingtheIL-1βsecretion,andblockingtheinflammatoryactioninmesangialregion.KeyC增殖的影响(略)与空白血清组比较,**P0.01;与通脉口服液组比较,△P0.05,△△P0.01;与LPS通脉口服液组比较,▲▲P0.01;n=62.2通脉口服液对系膜细胞IL-1β蛋白分泌的影响结果见表2。结果显示,..毕业LPS组在不同时间段较空白对照组IL-1β产生量均明显增加,且有非常显著差异(P<0.01),并在加入LPS1
7、2h时分泌量最多,但与其它时间点比较差异无显著性(P>0.05)。LPS+通脉口服液组与LPS组在6,12,24h比较IL-1β分泌量均下降,在6,12h两个时间点有非常显著性差异(P<0.01),而24h时间点有显著性差异(P<0.05)。在3h时间点LPS+通脉口服液组与LPS组比较IL-1β无明显差异。表2各组分在不同时段对大鼠系膜细胞IL-1β水平(略)与空白对照组比较,*P0.05,**P0.01;与LPS比较,△△P0.01;n=43讨论自1975年Fish等[7]首次在体外培养中获得
8、较纯肾小球系膜细胞(MC)以来,肾小球系膜细胞的体外培养为研究各种肾小球疾病提供了基础条件,是研究增殖性肾小球肾炎必不可少的手段之一。肾小球系膜细胞增殖及系膜基质聚积,是多种肾小球疾病,尤其是系膜增生性肾炎突出的病理学特征。正常情况下,人体内肾小球系膜细胞的数量、形态和位置保持相对的稳定,而在体外培养条件下,用于实验研究的细胞均处于指数生长期,在此阶段,细胞若处于理想的培养条件,将不断的生长繁殖,细胞数量日渐增加[6]。因此,与正常体内肾小球系膜细胞生长状况相比,正常培养条件下体外
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