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时间:2018-11-20
《血管性痴呆小鼠海马nos活力和nnos蛋白表达的改变》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、血管性痴呆小鼠海马NOS活力和nNOS蛋白表达的改变【关键词】血管 ChangesofNOSactivityandnNOSexpressioninhippocampusofvasculardementiamice 【Abstract】AIM:Toobservetheactivitychangesofnitricoxidesynthase(NOS)andtheexpressionlevelofneuronalnitricoxidesynthase(nNOS)inthehippocampusofv
2、asculardementia(VD)miceandtoinvestigatethemechanismunderlyingVD.METHODS:ModelsofVDmiceade.NADPHdhistochemistryandnNOSimmunohistochemistryazetestemoryabilities.RESULTS:paredemoryabilitiesoftheVDgroupsignificantlydecreased(P<0.01)andthenumberofNOSpos
3、itiveneuronsandnNOSpositiveneuronsinthehippocampussignificantlyincreased(P<0.05).CONCLUSION:VDisprobablyrelatedtotheincreaseofthenumbersofNOSpositiveneuronsandnNOSpositiveneuronsinthehippocampus. 【Keyentia,vascular;hippocampus;neuronalnitricoxides
4、ynthase;nitricoxidesynthase 【摘要】目的:观察血管性痴呆(VD)小鼠海马内一氧化氮合酶(NOS)的活性和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的表达,探讨VD的发生机制.方法:复制小鼠VD模型,利用Y迷宫检测VD模型小鼠学习记忆能力,采用NADPHd组织化学和nNOS免疫组织化学方法,研究VD小鼠与正常小鼠海马NOS和nNOS阳性神经元数量的变化.结果:VD小鼠比正常小鼠Y迷宫学习记忆训练次数明显增多,差异有显著性(P<0.01);海马CA1区NOS和nNO
5、S阳性神经元的数量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05).结论:VD的发生可能与海马NOS和nNOS阳性神经元的数量增多有关. 【关键词】痴呆,血管性;海马;神经元型一氧化氮合酶;一氧化氮合酶 0引言 自20世纪80年代发现内源性一氧化氮(nitricoxide,NO)以来,其复杂的生理及病理作用已引起人们的广泛重视.NO是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)催化L精氨酸而生成,NOS在脑缺氧缺血中的双重作用已日益受到重视.我们采用组织化学和免疫组织
6、化学的方法,探讨(vasculardementia,VD)小鼠海马结构内NOS和nNOS阳性神经元数目的变化以期揭示VD的发生机制. 1材料和方法 1.1材料 成年健康昆明系雄性小鼠共36只(购自天津市实验动物中心),体质量(30±3)g,随机等分为3组:正常对照组、假手术组、VD模型组(n=12). 1.2方法 1.2.1小鼠VD模型的制备室温18~22℃,将小鼠称质量后用4g/L戊巴比妥钠(10mL/kg,ip)麻醉后,仰卧固定在手术台上,颈正中切口,手术分离双侧颈总动脉(monca
7、rotidarteries,CCA)穿线备用,模型组在夹闭双侧CCA之前,腹腔注射硝普钠(2.5mg/kg),随即用无创动脉夹夹闭双侧CCA10min,通10min,再夹闭10min,再通后缝合伤口,放回笼中保温饲养[1].假手术组麻醉及手术方法与模型组相同,但仅暴露双侧CCA,不阻断CCA,不注射硝普钠,观察时间与模型组相同. 1.2.2学习记忆能力的测定造模后7d,根据小鼠既怕光刺激又怕电刺激的本性,开始Y迷宫行为学测试.Y迷宫分为三臂,臂与臂之间角度为120°.在每支臂内,有光刺激时无电刺
8、激,无光刺激时有电刺激,迷宫实验时,三臂中两臂有电刺激而无光刺激,一臂有光刺激而无电刺激.将动物放入迷宫的一臂(有光、无电)适应60s后切换光源(无光源的两臂及三臂连接处有电),待动物进入有光无电处后开始记时,30s时切换光源.如此进行切换20次,每次切换光源都使动物学习1次,每日每只动物最多如此学习20次,第20次切换后待动物进入有光无电处后适应30s将动物取出.每只动物连续9次从无光有电处直接进入有光无电处为学会,第1日学不会者第2日继续学习,直至学会.将学会次数进行统计学分析
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