fgf23过表达对小鼠肾、肝和海马中sod、gshpx活力和mda含量的影响

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1、FGF23过表达对小鼠肾、肝和海马中SOD、GSHPX活力和MDA含量的影响【摘要】目的：研究成纤维细胞生长因子(FGF)23过表达对小鼠肾、肝和海马组织中氧化及抗氧化系统的影响，探讨FGF23过表达致衰老的可能机制。方法：采用8周龄过表达人FGF23转基因小鼠模型，检测转基因和野生型小鼠血清磷水平，测定肾、肝和海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)的活力以及丙二醛(MDA)的含量。结果：与野生型小鼠相比，FGF23转基因小鼠血清磷水平显著降低(P<0.001);肾组织中SOD和GSHPX的活力均

2、显著降低(P<0.001)，MDA的含量显著升高(P<0.001);海马组织中SOD和GSHPX的活力明显降低(P<0.05或P<0.01)，MDA的含量明显升高(P<0.01)。肝组织中SOD、GSHPX的活力和MDA的含量与野生型小鼠相比差异不显著(P>0.05)。结论：FGF23过表达能够导致肾和海马组织氧化损伤，FGF23过表达致衰老与这些组织中氧化与抗氧化系统的失衡有一定的关系。【关键词】成纤维细胞生长因子23;超氧化物歧化酶;谷胱甘肽过氧化物酶;丙二醛;衰老　　[Abstract]Objec

3、tive:Toinvestigatetheeffectsoffibroblastgrosinmouserenal,hepaticandhippocampaltissuesinordertoelucidatethemechanismofagingcausedbyFGF23overexpression.Methods:Theserumphosphatelevels,superoxidedismutase(SOD)andglutathioneperoxidase(GSHPX)activityandmalondialdehyde(MDA)content

4、seasuredandanalyzedbytheparisonofeighticeoverexpressinghumanFGF23totheiragematchedates.Results:paredates,serumphosphatelevelofFGF23transgenicmicepaltissue.HopaltissuesaybecontributedtotheagingcausedbyFGF23overexpression.　　[Keyutase;glutathioneperoxidase;malondialdehyde;ag

5、ing　　成纤维细胞生长因子(fibroblastgrom)提取DNA进行PCR扩增鉴定，8周龄时用于实验研究。每组8只，雌雄各半，采用同窝同性别配对。FGF23基因引物序列：上游5′CTCTGGGTCTGTGCCTTGTGC3′，下游5′GGAGTACGG　　GGGTGGGTTCAT3′，PCR扩增片段长度为444bp。内参GAPDH引物序列：上游5′CATTTCACTCAAGGTTGT　　CAGC3′，下游5′ATCATACTTGGCAGGTTTCTCC3′，PCR扩增片段长度为346bp。引物由上海Invitrogen公司合

6、成。　　1.2血清磷检测　　两组动物经电子天平称质量后，7.5%(5μl·g-1)水合氯醛腹腔注射麻醉，剥离胸部皮肤，经胸腔外心脏穿刺取血，4000×g离心5min，取上清制成血清样本，按磷检测试剂盒要求检测血清磷水平。无机磷检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。　　1.3组织匀浆制备与超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活力和丙二醛(MDA)含量测定动物经脱颈处死后，打开腹腔取出肾、肝，断头取脑，迅速分离海马，将肾、肝、海马置于冰上，称质量后加入预冷的生理盐水，按试剂盒要求制备组织匀浆。SOD和GSHPX活力检测分别采用

7、黄嘌呤氧化酶比色法和还原型谷胱甘肽消耗法，MDA含量测定采用硫代巴比妥酸法，测试仪器为上海尤尼科V2102型分光光度计。组织蛋白定量按考马斯亮兰试剂盒说明书测定。上试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。　　1.4统计学处理　　检测所得数据以±s表示，采用t检验进行统计学处理，P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1基因型鉴定结果　　基因型鉴定结果显示，野生型小鼠只有346bp条带，因为其PCR产物中仅有内参GAPDH;转基因小鼠有346bp和444bp两个条带，因为其PCR产物中还含有人FGF23。见图1。　　2.2FGF23

8、过表达对血清磷水平的影响　　为了明确FGF23过表达对血清磷的影响，我们通过血液生化检测观察了FGF23转基因与野生型