墨旱莲水煎剂对致衰老小鼠肝脏中SOD、MDA、GSHPx的影响.doc

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1、墨旱莲水煎剂对致衰老小鼠肝脏中SOD、MDA、GSHPx的影响作者：石变华庄晓燕白秀珍【摘要】目的：研究墨旱莲对D半乳糖致衰老小鼠肝脏中SOD、MDA、GSHPx的影响。方法：通过测定小鼠肝脏SOD、GSHPx的活性及MDA的含量的变化，研究墨旱莲水煎剂的延缓衰老功效。结果：墨旱莲水煎剂会显著增强SOD、GSHPx的活性，降低MDA的含量。结论：墨旱莲水煎剂有显著的延缓衰老作用。【关键词】墨旱莲；D半乳糖；衰老；肝脏　　中药墨旱莲为菊科植物鳢肠（EcliptaprostrataL）的全草。其性味甘、酸、凉，入肝、肾、胃、小肠、大肠五

2、经，对临床很多疾病有很好的治疗效果。墨旱莲具有免疫调节、扩血管、抗诱变、抗炎等药理作用。本实验以D半乳糖致衰老小鼠为研究对象，探讨墨旱莲的延缓衰老作用。　　1材料和方法　　11材料　　111药品与试剂墨旱莲购自锦州大德堂药房；MDA、SOD、GSHPx测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所；其余试剂均为国产分析纯试剂。　　112实验动物昆明系小鼠，3月龄，25～30g，雌雄各半。由辽宁医学院实验动物中心提供。　　113墨旱莲水煎剂的制备①制备前准备：墨旱莲干品蒸馏水漂洗3次，烘箱干燥后用粉碎机粉碎，过100目筛；②水煎剂的制备：

3、将过筛的墨旱莲以蒸馏水浸泡半小时，加热至沸腾，文火煮1小时，如此反复3次，将3次所得的煎出液混合后减压浓缩，干燥后待用；③用药前准备：将提取物以蒸馏水溶解，配制成每毫升相当于生药1.0g的溶液。　　12方法　　121实验动物分组及用药取昆明系小鼠50只，随机分成5组，每组10只。Ⅰ组空白对照组，Ⅱ组半乳糖致衰组，Ⅲ组低剂量用药组，Ⅳ组中剂量用药组，Ⅴ组高剂量用药组。Ⅰ组每日灌胃生理盐水，Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组每日皮下注射D半乳糖1mg/10g鼠重，同时灌胃墨旱莲水煎剂分别为6mg/g、12mg/g、24mg/g鼠重。连续42天，第43天

4、取材检测。3　　122肝组织SOD、MDA和GSHPx的测定按照试剂盒说明书测定。　　123数据处理实验数据采用SPSS11.5统计软件处理，计算均值及标准差均采用t检验。　　2结果　　Ⅱ组与Ⅰ组比较血清和肝脏SOD、GSHPx的活性降低且MDA的含量升高；Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组中肝脏SOD、GSHPx的活性与Ⅱ组比较均有不同程度的升高且MDA的含量有不同程度的降低，即墨旱莲由于剂量不同表现出不同程度的延缓衰老作用。其中尤以Ⅴ组的作用最显著。见表1。　　表1墨旱莲水煎剂对肝的延缓衰老作用（略）　　注：与正常组相比，*P＜0.01;与D

5、半乳糖组相比，#P＜0.05,##P＜0.01。　　3讨论　　正常机体的自由基氧化作用与抗氧化防御作用处于动态平衡状态。当清除自由基的酶和非酶系统的防御功能减退时，这种动态平衡失调，导致生物体老化［1］。D半乳糖亚急性中毒动物是国内外近年常用的衰老模型［2］，已证明D半乳糖可产生拟衰老反应，对氧自由基代谢的损伤与人体衰老的改变基本一致［3］。本实验D半乳糖致小鼠衰老，实验结果显示Ⅱ组小鼠SOD、GSHPx的活性及MDA的含量与Ⅰ组比较有显著差异(P<0.01)，证明本实验D半乳糖致衰老模型成功。国内已有实验证实墨旱莲黄酮类提取物

6、有延缓衰老的作用［4］。本实验利用D半乳糖制造小鼠衰老模型，给小鼠口服不同剂量的墨旱莲水煎剂。从表1中可看出，Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组中SOD、GSHPx的活性高于Ⅱ组及MDA的含量低于Ⅱ组，且呈剂量依赖性，说明墨旱莲水煎剂对D半乳糖致衰老小鼠有显著延缓衰老作用。细胞线粒体是氧自由基损伤的主要靶位，也是细胞内源性氧自由基的主要来源［4］。线粒体的老化是细胞衰老的重要原因之一［5］。脂质过氧化（LPO）产物MDA的水平往往可反映活性氧损伤程度。抗氧化酶SOD和GSHPx活性是反映机体抗氧化能力的重要指标。所以认为墨旱莲的延缓衰老的作用机理可能是保

7、护线粒体免受自由基损害。墨旱莲延缓衰老作用的有效成分可能是黄酮类成分［6］，具体还有待于进一步研究。【参考文献】　　1NohlH.Involvementoffreeradicalsinageing:aconsequenceorcauseofsenescence.BriMedBull,1993，49(3):653　　2龚国清,徐黻本.小鼠衰老模型的研究.中国药科大学学报,1991,22:101~103.　　3张熙，李文彬.D半乳糖亚急性中毒大鼠拟衰老生化改变.中国药理学与毒理学杂志，1990，4（4）：3093　　4许春富.自由基清除剂对脑

8、缺血的保护作用.国外医学脑血管病分册，1994，2：213　　5刘永海,吴丽娟,陈清棠.线粒体形态结构随增龄的变化.中华老年医学杂志，1996，15