烟叶蛋白的分离纯化

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1、中国矿业大学研究生学术专题研讨会记录第次时间2010.5.14地点专题汇报人（1）汇报主题烟叶蛋白的分离纯化（2）专题汇报人（2）汇报主题研讨会记录：烟叶蛋白的分离纯化（2）1.研究背景及意义烟草作为一种高产作物，具有丰富的原料来源。烟叶蛋白质量高，营养平衡，在目前所研究的植物蛋白中位居首位。2.烟草蛋白功能特性烟草中的蛋白质分为可溶性蛋白和不溶性蛋白。可溶性蛋白一半左右是叶绿体蛋白，另一半为其他可溶性蛋白质的复合物。3.实验安排烟叶蛋白的分离纯化研究主要包括三方面：（1）最大化地将烟叶细胞中的可溶性蛋白溶解到提取液中；（2）通过大孔树脂法来除去提取液中的杂质，调节各因素来获得

2、最佳的烟叶蛋白结晶条件；（3）对烟叶蛋白结晶体进行纯度鉴定。目前第一阶段的实验已基本完成。4.实验进展（1）标准曲线绘制采用考马斯亮蓝法（Bradford3法）来标定提取液中的可溶蛋白含量。以牛血清蛋白（BSA）为标准蛋白。（2）蛋白标准液称取100mg牛血清蛋白，溶于100ml蒸馏水中，即为1000μg/ml的蛋白溶液(3)提取液盐浓的影响(4)提取时间的影响(5)提取温度的影响(6)料液比的影响(7)脱脂剂的影响结论：1.提取温度<40℃,不随温度改变而改变提取率，室温下提取即可；2.pH在中性条件下有较大的提取率，建议采用含NaCl的缓冲溶液；3.脱脂剂石油醚的加入并没有

3、提高蛋白提取率；4.抗氧化剂的加入对蛋白提取率有不同程度的提升，但前提是提取液的pH不因此发生大的变化，柠檬酸虽然不具备还原性，但它的效果在三种添加剂中效果最好，其次是VC；主持人签字：日期：年月日33