分光光度法测定夏枯草中总皂苷的含量论文

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1、分光光度法测定夏枯草中总皂苷的含量论文.freeleasurethecontentoftotalsaponinsinselfhealherb.［Method］Extractselfhealresolutioneasurecontentoftotalsaponinsinsampleetry.［Result］In26.95～94.31μg，thetotalsaponinhasgoodlinearrelationshippleshavesaponins2.02%～2.56%.［Conclusion］Spectrophotometryme

2、asuringsaponinsinselfhealiscorrect，reliableandeasyofoperation.Keyetry;contentmeasure夏枯草为唇形科植物夏枯草（BrunellaecumfructuL.）的干燥果穗，具有清火、明目、散结、消肿之功效，用于目赤肿痛，头痛眩晕，瘰疬，乳痈肿痛，高血压，急性黄疸型传染性肝炎等病症［1］。夏枯草含有齐墩果酸等三萜类成分、β谷甾醇等甾体类成分、木犀草素等黄酮类成分、香豆素、苯丙素、有机酸、挥发油等成分，现代药理学研究表明，其具有降压、降糖、抗炎、免疫抑制、抗

3、菌、抗病毒等作用［2］。本文采用紫外分光光度法测定夏枯草中总皂苷的含量，为夏枯草研究的进一步完善及质量控制提供实验依据。1实验材料1.1实验仪器与试剂3300pro紫外可见分光光度计，安玛西亚中国有限公司；水浴锅：上海；所用试剂均为分析纯；对照品：齐墩果酸（1107092－200304，供含量测定用，中国药品生物制品检定所）；夏枯草药材：取自本院药房，产地浙江。2实验方法与结果2.1对照品溶液的制备取齐墩果酸对照品适量，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液（每ml相当于0.135mg齐墩果酸

4、）。2.2供试品溶液的制备夏枯草药材，粉碎，取药材粉末约0.5g，称定重量，置于50ml容量瓶中，加入甲醇50ml，称重，超声45min，取出，甲醇补足失重，过滤，取续滤液。2.3最大吸收波长的选择取适量供试品和对照品溶液，分别置具塞试管中，挥干溶剂，加入5％香草醛－冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴15min，取出置冰水浴冷却后加入5ml冰醋酸，摇匀，在400～700nm波长范围内扫描，结果表明，样品与对照品在550nm附近均有最大吸收峰，综合考虑，选择550nm作为测定波长。2.4标准曲线的制备分别取对

5、照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置具塞试管中，挥干溶剂，精密加入5％香草醛－冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴15分钟，取出置冰水浴冷却后加入5ml冰醋酸，摇匀，在550nm处测定吸光度。回归方程为Y=0.008x-0.0146（r=0.9991），在26.95～94.31μg范围内总皂苷（以齐墩果酸计）与吸光度线性关系良好。2.5显色稳定性试验取供试品溶液0.2ml置具塞试管中，挥干溶剂，按标准曲线制备项的方法测定吸光度，连续测定2h，结果表明2h内稳定。2.6精密度试验

6、取同一供试品溶液0.2ml加入具塞试管中，挥干溶剂，按标准曲线制备项的方法测定吸光度，连续测定6次，吸光度依次为0.395、0.395、0.394、0.394、0.394、0.395，表明仪器精密度良好（RSD=0.17％）。2.7重复性试验分别取同一批夏枯草样品五份，按“供试品溶液制备”项下方法制成供试液，取0.2ml置具塞试管中，挥干溶剂，按照标准曲线制备项下的方法测定吸光度，计算样品中总皂苷的含量依次为2.59％、2.59％、2.50％、2.47％、2.49％，表明，重复性良好（RSD=2.28%）。2.8加样回收率试验取已

7、知含量的同批样品，分别添加一定量的齐墩果酸对照品，按“供试品溶液制备”项下方法制成供试液，取供试液溶液适量加入具塞试管中，挥干溶剂，按照标准曲线制备项下方法测定吸光度，计算回收率，结果见表1，本实验方法回收率在97.0～100.5％之间，符合回收率要求（95％～105％）。表1总皂苷加样回收结果（略）回收率=（实测量样品中的量）/对照品加入量×100%2.9样品中总皂苷含量测定取不同批次夏枯草药材，按“供试品溶液制备”项下方法制成供试液，取0.2ml置具塞试管中，挥干溶剂，按照标准曲线制备项下的方法测定吸光度，计算样品中总皂苷的

8、含量，见表2。表2不同批夏枯草药材中总皂苷含量测定结果（略）3讨论夏枯草研究以药理学研究居多，其药学的研究主要以苯丙素、三萜类成分等的分离、纯化和结构鉴定以及齐墩果酸和熊果酸、咖啡酸和迷迭香酸等成分等的含量测定为主；总类成分的研究较少，仅限于总黄酮