分光光度法测定夏枯草中总皂苷的含量

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1、分光光度法测定夏枯草中总皂苷的含量【摘要】［目的］测定夏枯草药材中总皂苷的含量。［方法］甲醇超声提取夏枯草样品溶液，5％香草醛－冰醋酸显色，分光光度法测定样品中总皂苷含量。［结果］总皂苷在26.95～94.31μg范围内与吸光度呈良好的线性关系，回收率在97.0％～100.5％之间；三批夏枯草样品中总皂苷的含量在2.02%～2.56%之间。［结论］分光光度法测定夏枯草中总皂苷的含量，方法准确可靠、操作简便。【关键词】夏枯草;总皂苷;分光光度法;含量测定　　Abstract：［Objective］Tomeasure

2、thecontentoftotalsaponinsinselfhealherb.［Method］Extractselfhealresolutioneasurecontentoftotalsaponinsinsampleetry.［Result］In26.95～94.31μg，thetotalsaponinhasgoodlinearrelationshippleshavesaponins2.02%～2.56%.［Conclusion］Spectrophotometrymeasuringsaponinsinselfh

3、ealiscorrect，reliableandeasyofoperation.　　Keyetry;contentmeasure　　夏枯草为唇形科植物夏枯草（BrunellaecumfructuL.）的干燥果穗，具有清火、明目、散结、消肿之功效，用于目赤肿痛，头痛眩晕，瘰疬，乳痈肿痛，高血压，急性黄疸型传染性肝炎等病症［1］。夏枯草含有齐墩果酸等三萜类成分、β谷甾醇等甾体类成分、木犀草素等黄酮类成分、香豆素、苯丙素、有机酸、挥发油等成分，现代药理学研究表明，其具有降压、降糖、抗炎、免疫抑制、抗菌、抗病毒等作用［

4、2］。本文采用紫外分光光度法测定夏枯草中总皂苷的含量，为夏枯草研究的进一步完善及质量控制提供实验依据。　　1实验材料　　1.1实验仪器与试剂　　3300pro紫外可见分光光度计，安玛西亚中国有限公司；水浴锅：上海；所用试剂均为分析纯；对照品：齐墩果酸（1107092－200304，供含量测定用，中国药品生物制品检定所）；夏枯草药材：取自本院药房，产地浙江。　　2实验方法与结果　　2.1对照品溶液的制备　　取齐墩果酸对照品适量，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液（每ml相当

5、于0.135mg齐墩果酸）。　　2.2供试品溶液的制备　　夏枯草药材，粉碎，取药材粉末约0.5g，称定重量，置于50ml容量瓶中，加入甲醇50ml，称重，超声45min，取出，甲醇补足失重，过滤，取续滤液。　　2.3最大吸收波长的选择　　取适量供试品和对照品溶液，分别置具塞试管中，挥干溶剂，加入5％香草醛－冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴15min，取出置冰水浴冷却后加入5ml冰醋酸，摇匀，在400～700nm波长范围内扫描，结果表明，样品与对照品在550nm附近均有最大吸收峰，综合考虑

6、，选择550nm作为测定波长。　　2.4标准曲线的制备　　分别取对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置具塞试管中，挥干溶剂，精密加入5％香草醛－冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴15分钟，取出置冰水浴冷却后加入5ml冰醋酸，摇匀，在550nm处测定吸光度。回归方程为Y=0.008x-0.0146（r=0.9991），在26.95～94.31μg范围内总皂苷（以齐墩果酸计）与吸光度线性关系良好。　　2.5显色稳定性试验　　取供试品溶液0.2ml置具塞试管中，挥

7、干溶剂，按标准曲线制备项的方法测定吸光度，连续测定2h，结果表明2h内稳定。　　2.6精密度试验　　取同一供试品溶液0.2ml加入具塞试管中，挥干溶剂，按标准曲线制备项的方法测定吸光度，连续测定6次，吸光度依次为0.395、0.395、0.394、0.394、0.394、0.395，表明仪器精密度良好（RSD=0.17％）。　　2.7重复性试验　　分别取同一批夏枯草样品五份，按“供试品溶液制备”项下方法制成供试液，取0.2ml置具塞试管中，挥干溶剂，按照标准曲线制备项下的方法测定吸光度，计算样品中总皂苷的含量依次

8、为2.59％、2.59％、2.50％、2.47％、2.49％，表明，重复性良好（RSD=2.28%）。　　2.8加样回收率试验　　取已知含量的同批样品，分别添加一定量的齐墩果酸对照品，按“供试品溶液制备”项下方法制成供试液，取供试液溶液适量加入具塞试管中，挥干溶剂，按照标准曲线制备项下方法测定吸光度，计算回收率，结果见表1，本实验方法回收率在97.0～100.5％之间，符