半边旗中黄酮的提取工艺研究论文

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1、半边旗中黄酮的提取工艺研究论文吕应年邓亦峰，梁念慈【摘要】目的确定提取半边旗总黄酮的最佳工艺条件，并精制以提高黄酮的含量。方法采用正交实验法，考察溶剂用量、乙醇浓度、提取时间以及提取次数对半边旗中总黄酮溶出量的影响，确定最佳提取条件，然后对半边旗总黄酮进行精制，用高效液相色谱测定已知黄酮的含量。结果在所考察的因素中，对半边旗总黄酮提取影响程度为乙醇浓度提取次数溶剂用量提取时间.freelizetheextractionconditionsforflavonoidsfromPterissemipinnat

2、aL.,andrefinetheflavonoidstoimprovethepurity.MethodsOptimizedconditionsincludingethanolquantity,ethanolconcentration,refluxdurationandextractiontimesinedbytheorthogonaltest.TheflavonoidsinedbyHPLC.ResultsTheorderoffactorstoaffecttheflavonoidextractionese

3、thanolquantityrefluxduration.Thebestextractiontechnologyesofextraction.Thepurityofrefinedflavonoidsple,reasonableandthecostisloipinnataL.;Flavonoids;Orthogonaltest;Refine半边旗PterissemipinnataL.，又名半边蕨、半边莲、单边旗，系凤尾蕨科植物，是一种南方常用草药，始载于《岭南采药录》，称半边旗。该植物有止血、生肌、解毒、

4、消肿之功效，民间用于治疗吐血、外伤出血、发背、疔疮、跌打损伤、目赤肿痛等［1］。现代研究表明，半边旗中含有挥发油、萜类、黄酮、皂苷等多种物质［2］。有关半边旗的药效成分研究主要集中在萜类化合物［3,4］，半边旗中黄酮类物质的研究报道较少。黄酮类化合物是中草药中一类重要的药效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血脂等广泛的生物活性，天然黄酮主要以游离的苷元或与糖结合成糖苷的形式存在于植物中。本研究采用正交实验法考察溶剂用量、乙醇浓度、提取次数、提取时间对半边旗总黄酮溶出量的影响，以确定最佳提取条件，并研究

5、了半边旗黄酮的精制方法，为合理开发利用半边旗资源提供依据。1器材岛津LC-10A高效液相色谱仪(LC-10ATVP泵，SCL-10AVP控制器，SPD-10AVP紫外检测器，CTO-10AVP柱温箱)；紫外分光光度计(岛津UV3101PC)；分析天平（Mettler,AE240）；旋转蒸发仪（上海申越科学仪器公司）；四用紫外分析仪（上海顾村科学器材厂）。芹菜素和木犀草素标准品购于天津尖峰植物提取物公司，甲醇为色谱纯（TEDIApanyInc.USA），提取及精制用乙醇、氯仿、醋酸乙酯均为分析纯（广州大华

6、试剂公司），其他化学试剂均为分析纯。半边旗植物采收于广东湛江郊区，经广东海洋大学杨燕君副教授鉴定为半边旗。2方法与结果2.1半边旗总黄酮的测定2.1.1标准曲线绘制参照文献［5］，采用紫外分光光度计法并适当调整。精密称定干燥至恒重的芦丁对照品2mg，加适量甲醇溶解，定容到10ml即得对照品储备液。精密吸取0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml对照品储备液于50ml容量瓶中，加甲醇至20ml，加入5%亚硝酸钠溶液2ml，摇匀，放置5min，加入10%硝酸铝溶液2ml，摇匀，放置6min，加入新

7、配制的5%氢氧化钠溶液20ml，用甲醇定容至50ml，用分光光度计于500nm处测定吸光度。以浓度(C)与相应的吸光度(A)进行回归分析，得回归方程A=0.1632C+0.0564，r=0.9976。2.1.2样品总黄酮的测定称取干燥半边旗粗粉10g，加入含溶剂的圆底烧瓶中，按表1的实验设计进行回流提取，过滤，取滤液挥干溶剂，残留物用甲醇溶解，定容到50ml，即得样品溶液，用分光光度计测定500nm处的吸光度值，由标准曲线计算样品总黄酮溶出量。2.2半边旗总黄酮的提取工艺考察2.2.1筛选因素水平半边旗

8、总黄酮采用醇提法。经预试验研究，提取过程中可能的影响因素包括溶剂用量（A）、乙醇浓度（B）、提取次数（C）以及提取时间（D）。以半边旗总黄酮溶出量为考核指标，按4因素3水平进行正交实验，因素水平见表1。表1因素水平表（略）2.2.2正交实验设计及结果按L9(43)正交表对半边旗进行提取并测定总黄酮量。结果见表2～3。表2正交实验结果及分析（略）表3最佳工艺验证实验（略）由表2和表3分析结果可知，在半边旗总黄酮的提取工艺中，各因素对提取效果的