半边旗中黄酮的提取工艺研究

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1、半边旗中黄酮的提取工艺研究作者：吕应年邓亦峰，梁念慈【摘要】　　目的确定提取半边旗总黄酮的最佳工艺条件，并精制以提高黄酮的含量。方法采用正交实验法，考察溶剂用量、乙醇浓度、提取时间以及提取次数对半边旗中总黄酮溶出量的影响，确定最佳提取条件，然后对半边旗总黄酮进行精制，用高效液相色谱测定已知黄酮的含量。结果在所考察的因素中，对半边旗总黄酮提取影响程度为乙醇浓度>提取次数>溶剂用量>提取时间，半边旗总黄酮最佳提取条件为12倍用量80%乙醇回流提取2次、每次回流2h，精制后半边旗黄酮含量达到84.3%以上。结论该工艺设计合理，操作简单，生产成

2、本低廉，有较高的工业生产应用价值。【关键词】半边旗黄酮正交实验精制　　Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractionconditionsforflavonoidsfromPterissemipinnataL.,andrefinetheflavonoidstoimprovethepurity.MethodsOptimizedconditionsincludingethanolquantity,ethanolconcentration,refluxdurationandextractiontimesinedbytheort

3、hogonaltest.TheflavonoidsinedbyHPLC.ResultsTheorderoffactorstoaffecttheflavonoidextractiones>ethanolquantity>refluxduration.Thebestextractiontechnologyesofextraction.Thepurityofrefinedflavonoidsple,reasonableandthecostisloipinnataL.;Flavonoids;Orthogonaltest;Refine　　半边旗Pter

4、issemipinnataL.，又名半边蕨、半边莲、单边旗，系凤尾蕨科植物，是一种南方常用草药，始载于《岭南采药录》，称半边旗。该植物有止血、生肌、解毒、消肿之功效，民间用于治疗吐血、外伤出血、发背、疔疮、跌打损伤、目赤肿痛等［1］。现代研究表明，半边旗中含有挥发油、萜类、黄酮、皂苷等多种物质［2］。有关半边旗的药效成分研究主要集中在萜类化合物［3,4］，半边旗中黄酮类物质的研究报道较少。　　黄酮类化合物是中草药中一类重要的药效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血脂等广泛的生物活性，天然黄酮主要以游离的苷元或与糖结合成糖苷的形式存在于植物中。本研究采用

5、正交实验法考察溶剂用量、乙醇浓度、提取次数、提取时间对半边旗总黄酮溶出量的影响，以确定最佳提取条件，并研究了半边旗黄酮的精制方法，为合理开发利用半边旗资源提供依据。　　1器材　　岛津LC-10A高效液相色谱仪(LC-10ATVP泵，SCL-10AVP控制器，SPD-10AVP紫外检测器，CTO-10AVP柱温箱)；紫外分光光度计(岛津UV3101PC)；分析天平（Mettler,AE240）；旋转蒸发仪（上海申越科学仪器公司）；四用紫外分析仪（上海顾村科学器材厂）。芹菜素和木犀草素标准品购于天津尖峰植物提取物公司，甲醇为色谱纯（TEDIApanyInc.

6、USA），提取及精制用乙醇、氯仿、醋酸乙酯均为分析纯（广州大华试剂公司），其他化学试剂均为分析纯。半边旗植物采收于广东湛江郊区，经广东海洋大学杨燕君副教授鉴定为半边旗。　　2方法与结果　　2.1半边旗总黄酮的测定　　2.1.1标准曲线绘制参照　　2.2半边旗总黄酮的提取工艺考察　　2.2.1筛选因素水平半边旗总黄酮采用醇提法。经预试验研究，提取过程中可能的影响因素包括溶剂用量（A）、乙醇浓度（B）、提取次数（C）以及提取时间（D）。以半边旗总黄酮溶出量为考核指标，按4因素3水平进行正交实验，因素水平见表1。表1因素水平表（略）　　2.2.2正交实验设计及

7、结果按L9(43)正交表对半边旗进行提取并测定总黄酮量。结果见表2～3。表2正交实验结果及分析（略）表3最佳工艺验证实验（略）　　由表2和表3分析结果可知，在半边旗总黄酮的提取工艺中，各因素对提取效果的影响程度依次为B>C>A>D，且因素B（乙醇浓度）和C（提取次数）的影响具有统计意义，因此应选B2和C2，确定最优水平组合为A3B2C2D3，即溶剂为12倍量的80%乙醇回流提取2次、2h/次。　　2.2.3放大的提取工艺验证实验称取3份半边旗干燥粗粉各500g，采用A3B2C2D3最佳工艺条件提取，按“2.1.2”方法测定提取液总黄酮含

8、量平均为1.68mg/g生药。提取液减压蒸去溶剂，所得浸膏60℃真空干燥72h，