云南松中莽草酸含量的高效液相色谱法测定论文

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1、云南松中莽草酸含量的高效液相色谱法测定论文夏从龙，周浓，刘光明，张海珠，张烨【摘要】目的建立云南松中莽草酸的高效液相色谱测定方法，以分别考察云南松的不同部位中莽草酸的含量。方法色谱柱为AgilentZorbaxXDB-C18(4.6mm×150mm，5μm)，流动相为甲醇-1%磷酸水溶液(3∶97).freell·min-1，检测波长为214nm，柱温为25℃。结果莽草酸线性范围为0.083～1.66μg，相关系数r=0.9999，平均回收率为99.12%，RSD为1.16%(n=6)。云南松不同部位均含有莽草酸成分，且含量差异较大。结论云南松中的莽草酸可以作为新的莽草酸资源加以开发利用。

2、【关键词】云南松;莽草酸;高效液相色谱法Abstract：ObjectiveToinvestigatethecontentofshikimicacidindifferentpartsofPinusyunnanensisbyestablishingthehighperformanceliquidchromatographicmethod.MethodsAgilentZorbaxXDB-C18column(4.6mm×150mm,5μm)obilephaseethanol-1%phosphoricacidsolution(3:97),theflol·min-1,.freel,columntem

3、peratureicacidelement,andthecontentshoicacidinP.yunnanensiscanbeusedastheneicacidresourcesforexploitationandutilization.Keyicacid;HPLC云南松PinusyunnanensisFranch.为松科松属植物，为我西南森林资源的重要树种1。松的药用历史始载于《名医别录》《本草纲目》中较为详细地描述了松针、松塔等的产地、形态、功效与主治2，主要含萜类、黄酮类等成分。现代药理学研究证明莽草酸具有较强的抗炎、镇痛、抑制血小板聚集和抗HIV作用3，4，也是目前唯一在临床上治

4、疗感染禽流感病毒的人的有效药物“达菲”的基本原料5。莽草酸的化学合成，目前由于反应条件苛刻、成本高而难以满足市场需求，筛选廉价的莽草酸提取原料显得十分迫切6。我国云南松资源丰富。为了寻找该植物中的活性成分，综合利用其资源，本研究首次采用HPLC法测定云南松的松针、松塔、松枝、树皮中莽草酸含量，为有针对性地开发利用我国各地丰富的云南松资源中莽草酸提供科学依据。1仪器与试药Agilent1100高效液相色谱仪;KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);AE240电子天秤〔(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)〕。莽草酸对照品(HPLC峰面积归一化法测定纯度达99%以上，成都曼斯特

5、生物科技有限公司)。甲醇、乙腈为色谱醇(美国Tedia试剂公司)，水为娃哈哈纯净水，其他试剂均为国产分析纯。云南松样品2009-08-19采集于云南省大理、漾鼻两地，经笔者鉴定为云南松PinusyunnanensisFranch.。2方法与结果2.1色谱条件及系统适用性色谱柱为AgilentZorbaxXDB-C18(4.6mm×150mm，5μm)，流动相为甲醇-1%磷酸水溶液(3∶97)，流速为0.8ml·min-1，检测波长为214nm，柱温为25℃。理论塔板数按莽草酸峰计算不低于5000，与其他峰的分离度均大于1.5。对照品溶液和供试品溶液分别进样10μl，记录色谱图，莽草酸的保留

6、时间约为2.8min。见图1。1.莽草酸(shikimicacid)图1莽草酸对照品(A)和云南松样品(B)的HPLC色谱图2.2溶液的制备2.2.1对照品溶液的制备精密称取莽草酸对照品适量，置25ml棕色容量瓶中，加重蒸水溶解并定容至刻度，摇匀，即得对照品贮备液(每毫升含莽草酸83μg)。2.2.2供试品溶液的制备精密称取样品1g，置具塞锥形瓶中，加重蒸水100ml，超声处理(功率200.北京:中国林业出版社，1998:266.2杨鑫，丁怡，张东明，等.华山松松塔化学成分的研究J.中国中药杂志，2005，30(7):518.3马怡，孙建宁，徐秋萍，等.莽草酸对血小板聚集和凝血的抑制作用J

7、.药学学报，2000，35(1):1.4方玉珍，宋杰云，岑燕飞，等.毒八角酸的镇痛作用研究J.贵阳中医学院学报，1989，1:59.5刘永友，廖晓峰.莽草酸的研究进展J.化工时刊，2007，27(3):54.6刘相奎，王强，袁哲东.(一)-莽草酸合成路线图解J.中国医药工业杂志，2006，37(1):70.7汪红，边清泉.雪松叶中莽草酸的RP-HPLC测定J.中国医药工业杂志，2007，38(11):797.8马廉举，刘