高效液相色谱法测定解毒利尿颗粒中甘草酸含量论文

《高效液相色谱法测定解毒利尿颗粒中甘草酸含量论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、高效液相色谱法测定解毒利尿颗粒中甘草酸含量论文杜树山，张铮，张海鸣，沈圣民，曹杰，关铭【摘要】目的建立解毒利尿颗粒中甘草酸含量的高效液相测定方法。方法采用DiamonsilTMC18柱(250mm×4.6mm，5μm)，以甲醇-0.02mol·L-1醋酸铵-冰醋酸(33∶1)(64∶36)为流动相.freell·min-1;柱温30℃;检测波长250nm。结果甘草酸在0.15～0.75μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9998)，该方法平均回收率为98.99%，RSD为1.74%(n=6)。结论该方法简便、稳定易行、

2、准确、重现性较好，结果可靠，可为解毒利尿颗粒的质量评价提供有效依据。【关键词】高效液相色谱法;解毒利尿颗粒;甘草酸Abstract：ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofglycyrrhizicacidinJieduLiniaogranulesbyHPLC.MethodsDiamonsilTMC18column(5μm,.freelm×4.6mm)ethol-(0.02mol·L-1ammoniumacetate-glacialaceticacid(33∶1))(64

3、∶36)asmobilephase.Theflol·min-1，thecolumntemperature.ResultsThecalibrationcurveethodisconvenient,stableandaccurate,soitcanbeusedfordeterminationofglycyrrhizicacidinJieduLiniaogranules.Key32色谱工作站;KQ-250DB数控型超声波清洗器(昆山市超声仪器公司);METTERToledoAG1351/10万电子分析天平(瑞士METTER公

4、司)。甘草酸铵(中国药品生物制品检定所，批号：110731-200511)。解毒利尿颗粒样品(自制，批号：20060811，20060813，20060816)。甲醇为色谱纯，水为纯净水，其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱为DiamonsilTMC18(250mm×4.6mm，5μm);流动相为甲醇-0.02mol·L-1醋酸铵-冰醋酸(33∶1)(64∶36);检测波长250nm;流速1.0ml·min-1;柱温30℃。进样量10μl。根据试验结果，考虑到仪器、色谱柱、流动相的配制和温度等系统因素的

5、影响，规定理论板数按甘草酸峰计算，应不低于2000。2.2对照品溶液的制备精密称取在五氧化二磷干燥器中干燥至恒重的甘草酸铵对照品1.25mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含甘草酸铵50μg，相当于甘草酸48.975μg)。2.3供试品溶液的制备取本品(批号20060811)5袋，粉碎，称取0.5g，精密称定，置100ml的量瓶中，加40%甲醇稀释至刻度，超声提取40min，静置，取上清液，滤过，取续滤液，即得。2.4阴性供试品溶液的制备按解毒利尿颗粒的处方，取除甘草提取物外的其他辅料依

6、照本品制备工艺制备阴性样品制剂。取阴性样品制剂0.5g，精密称取，按供试品溶液的制备方法制得阴性供试品溶液。2.5系统适应性试验按供试品测定方法进行测定。结果表明，甘草酸对照品与解毒利尿颗粒中甘草酸的保留时间一致，阴性供试品溶液在甘草酸色谱峰位置处无相应的峰出现，同时与其他组分分离完全，分离度为2.04，理论板数按甘草酸峰计算应不低于2000。结果见图1。2.6线性关系考察分别精密自动吸取此溶液3，5，8，10，13，15μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以进样量X(μg)对峰面积的积分值Y进行线性回归，

7、计算回归方程：Y=784579X-19762(r=0.9998)，试验结果表明甘草酸铵进样量在0.15～0.75μg范围内线性关系良好。A甘草酸铵对照品B供试品C阴性对照1.甘草酸图1HPLC图谱2.7精密度实验精密注入对照品溶液10μl，依法连续进样6次，测得甘草酸峰面积的RSD=1.82%，实验结果表明仪器精密度良好。2.8稳定性实验取同一供试品溶液(批号：20060811)，按0，2，4，6，8，12h时间间隔进样，分别测定峰面积，测定甘草酸的含量结果RSD为2.92%，表明供试品溶液在12h内稳定，样品含

8、量无明显变化，在此时间内测定供试品化学性质稳定。2.9重复性实验取6份样品(批号：20060811)，同前法测定样品中甘草酸的含量，RSD为2.45%，表明重现性良好。2.10加样回收实验取已知准确含量的样品(批号：20060811，含量为125mg/袋)6份，每份0.25g，精密称定，置100ml量瓶中。精密加入甘草酸铵对照品(