高效液相色谱法测定水煎法提取中成药中的甘草酸含量论文

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1、高效液相色谱法测定水煎法提取中成药中的甘草酸含量论文杜学勤，刘焕蓉，郭志强，邓并【摘要】目的建立HPLC法测定以水煎法提取19种中成药中甘草酸（GA）的含量。方法采用日本岛津PC8色谱柱；流动相为甲醇-水-醋酸（57.0∶42.6∶0.4）；检测波长为254nm；流速2.0ml·min-1。结果甘草酸在200～2000μg·ml-1，r=0.9997的浓度范围内线性关系良好，平均回收率为96.55%，RSD=1.1%；同时研究了22种单味药对甘草中GA含量测定的影响。结论通过与冷浸法比较，水煎法和冷浸法提取中成

2、药中GA含量差值较大.freelinationofGlycyrrhizicAcidintheedicinebyHPLCAbstract：ObjectiveAnHPLCmethodinationofglycyrrhizicacid(GA)byextractingmethodofdecoctionin19kindsChinesepatentmedicinepreparedinlaboratory.MethodsPC8columnethanol-obilephase.Theflol·min-1anddetection

3、.ResultsThelinearrelationshipl-1（r=0.9997）.TheaveragerecoveryandRSDinationofGAbyselectinginterrelation22kindsofsinglemedicinalmaterial.ConclusionByparisonthedecoctionedicine;Glycyrrhizicacid;HPLC;Decoction甘草为豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.，胀果甘草Glycyrrhizain

4、flataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根及根茎，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药之功［1］，被广泛用于中药制剂处方中。甘草中主要活性成分为甘草酸［2］(glycyrrhizicacid，GA)，因此,我们选定甘草酸作为含甘草中成药的质量控制指标。甘草酸的含量测定方法报道很多，但大多数方法操作复杂，定量不够精确。近年来,高效液相色谱法测定GA也已有报道［3～6］，但对水煎法提取中成药中GA含量测定方法尚未见报道。本文在冷浸法研究的基础上采用高效液相色谱法测定水

5、煎生药中的GA和不同剂型中药复方制剂中的GA含量，为评价含GA药材及其制剂的质量提供了一个准确、灵敏、快速的测定方法。1仪器与试药1.1仪器日本岛津LC3A型高效液相色谱仪；日本岛津SPD-1型紫外吸收检测器；日本岛津CRIB型色谱仪数据处理机。1.2试剂无水甲醇、冰醋酸（均为分析纯，北京化工厂生产）；甘草酸铵盐对照品：（旋光度［a］20D60.5熔点209℃）纯度88.00%（内蒙呼和浩特天然甜素厂）；粉甘草（山西产）。单味中药材：滑石、朱砂、香附、陈皮、紫苏叶、葛根、黄芩、黄连、玄参、麦门冬、桔梗、麻黄

6、、杏仁、生石膏、萆薢、乌药、石菖蒲、益智仁、生地黄、当归、防风、蒲公英、金银花、连翘、紫菀、百部、海螵蛸、白芍、党参、白术、元胡、大黄、芒硝、枳实、厚朴、人参、茯苓、法半夏、橘红、木香、砂仁、冰片、川芎、白芷、羌活、细辛、薄荷、荆芥、柴胡、赤芍、桂枝、五味子、干姜、大枣（均为市售）。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱为日本岛津PC8柱（4mm×250mm）；流动相：甲醇-水-醋酸（57.0∶42.6∶0.4）；流速2.0ml·min-1；柱温：40℃；纸速2.5mm·min-1；检测波长254nm；进样量5μl。

7、本文是在冷浸法测定GA含量研究的基础上，考察水煎法，从而进行比较。所以首选冷浸法的色谱条件，测定水煎法中药制剂及生药中甘草酸与其它成分的分离。结果见图1～2。2.2对照品溶液制备取105℃干燥至恒重的甘草酸铵盐对照品精确称定，加甲醇制成每毫升含2.0mg的溶液，热溶，作为对照品贮备液。2.3甘草供试品溶液制备取甘草细粉约3g,精确称定，置150ml平底烧瓶内，加入100ml蒸馏水于电炉上煎煮回流1h放冷,过滤，离心分离10min(3000r/min)，吸取上清液,经沸水浴上蒸干,以约50ml57%甲醇溶液溶解残

8、渣，经G4砂芯漏斗抽滤，以57%甲醇稀释至100ml。2.4含甘草中药制剂样品溶液取300.0mg甘草粉，加入相应成方比例的各种单味药粉，混匀后，水煎法提取，方法如前。2.5线性关系考察分别精确量取甘草酸铵盐对照品贮备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml置于5ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，按上述色谱条件，分别依次进样，进样量5μl，测定峰面积。以甘草酸的峰面积（Y）对