nk细胞对小鼠h论文

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1、NK细胞对小鼠H论文张梅,吴迪,徐汇,贺鹏程,李静,习杰英,蔡瑞波,刘亚琳【关键词】杀伤细胞,天然;,骨髓移植;,移植物抗宿主病;,造血重建EffectofNKcellonGVHDandhematopoieticreconstitutionafterH2haploidenticalbonemarroice【Abstract】AIM:Toexploretheeffectofnaturalkiller(NK)cellongraftversushostdisease(GVHD)andhematopoieticreconstituti

2、onafterH2haploidenticalbonemarroice.METHODS:MurinemodelofH2haplotypemismatchedbonemarroouseasrecipient,andBalb/c(H2d)×C57BL/6(H2b)(H2d/b)mouseasdonor.LethallyirradiatedBalb/c(H2d)micearroatopoieticreconstitutionanifestations,pathologicalchangesandI1640液反复冲洗骨髓腔,0.83%

3、NH4Cl裂解红细胞后,用RPMI1640洗涤2次,调整细胞数为1×108/mL备用;脾脏于200目筛网上研磨滤过收集脾单个核细胞悬液,用0.83%NH4Cl裂解红细胞后,RPMI1640洗涤2次(作为T细胞),调整细胞数为1×108/mL备用.1.2.3供鼠NK细胞的分离选择H2d/b小鼠脾细胞悬液为H2单倍体相合NK细胞的来源,无菌条件下分离20只H2d/b小鼠脾脏,用200目筛网研磨收集细胞悬液,400目筛网过滤后制成脾单核细胞悬液,用0.83%NH4Cl裂解红细胞,计数细胞数,调整细胞浓度为1×107个细胞/90μL缓

4、冲液(磷酸盐缓冲液,pH7.2),按每107个细胞加入10μL抗NK细胞免疫磁珠(MiltenyiBiotec公司产品),4~8℃孵育15min后,用MiniMACS分选仪(MiltenyiBiotec公司产品)分选NK细胞,调整细胞数为5×106/mL备用.统计学处理:应用SPSS10.0统计包处理数据,多样本间均数比较用方差分析,率的比较用χ2检验.P0.05为差异有统计学意义.2结果2.1临床及病理表现单纯照射组均无脱毛、弓背体位、腹泻等GVHD的临床表现,移植后精神萎靡,体质量逐渐减轻,全部在2annaturalkil

5、lercells:Theirorigin,receptorsandfunction[J].EurJImmunol,2002,32:1205-1211.[3]RuggeriL,CapanniM,UrbaniE,etal.Effectivenessofdonornaturalkillercellalloreactivityinmismatchedhematopoietictransplants[J].Science,2002,295(6):2097-2100.[4]CooperMA,FehnigerTA,CaligiuriMA,e

6、tal.Biologyofhumannaturalkillercellsubsets[J].TrendsImmunol,2001,22:633-640.[5]RuggeriL,Shlomchik,etal.DonorvsrecipientallureactiveNKcellspreventGVHDbykillinghostAPCsinMHCdisparatehematopoietictransplants[J].BoneMarroatopoieticstemcelltransplantationusingunrelateddo

7、nors[J].Blood,2004,103:2860-2861.[7]Murphyurphyethods,1996,9:344-351.

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