不同浓度骨髓基质细胞修复大鼠牙周组织缺损的实验研究

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1、不同浓度骨髓基质细胞修复大鼠牙周组织缺损的实验研究作者：李艳芬赵欣闫福华骆凯郭建斌江俊【摘要】　　目的探讨不同浓度骨髓基质细胞（BMSCs）对牙周组织再生的影响。方法将BMSCs以不同浓度（5×105，5×106，5×107mL-1）与胶原膜BME10X复合培养后，复合物和空白胶原膜BME10X分别植入SD大鼠牙周缺损部位，并覆盖膨体聚四氟乙烯膜（ePTFE膜），以缺损处只覆盖ePTFE膜为对照组，4周后取材，HE染色观察牙周组织再生情况。结果各实验组新生牙槽骨面积与对照组相比有明显增加（P＜0.0

2、5），5×106，5×107mL-1组的新生牙槽骨量与5×105mL-1和空白BME10X组比较，差别有统计学意义（P＜0.05），而5×106，5×107，5×105mL-1与空白BME10X组组间比较则无统计学意义（P＞0.05）；各组新生牙骨质面积之间差别无统计学意义（P>0.05）。结论BMSCs浓度可影响其体内成骨能力，高浓度BMSCs能有效促进牙周组织再生。【关键词】组织工程；引导组织再生，牙周；牙周组织；骨髓细胞；胶原；疾病模型，动物　　ABSTRACT:ObjectiveToeval

3、uatetheeffectsofbonemarroalcells(BMSCs)embranesL-1,5×10mL-1,and5×107mL-1).TheplexandcollagenmembraneslyimplantedintotheperiodontaldefectsinSpragueDaembranes.Thedefectsembranealoneservedasacontrol.Periodontalregenerationetricmeasurementsedalveolarboneentalgr

4、oups(P＜0.05).Theareaofneedalveolarboneofthe5×106mL-1and5×107mL-1groupsL-1andblankgroups,ationL-1and5×107mL-1groups,the5×105mL-1andblankgroups.Thereedcementum.ConclusionBMSCsotetheperiodontaltissueregeneration.　　KEYSCs）移植可显著促进牙周组织再生［13］，但其有效接种浓度尚未完全明确。本研究将不

5、同浓度BMSCs与胶原膜BME10X复合，植入SD大鼠牙周缺损处，通过组织学观察和测量，探讨细胞接种密度对牙周组织再生的影响。　　1材料和方法　　1.1材料　　1.1.1动物及分组　　清洁级2～3月龄的雄性SD大鼠30只，体质量280～300g，由上海斯莱克实验动物中心提供［许可证号：SCXX（沪）20070005］。随机抽取25只，每只双侧下颌第一、二磨牙颊侧分别制备牙周缺损区作为实验区域，共50个缺损区，完全随机法分为5组。A组：ePTFE膜组；B组：空白BME组+ePTFE膜；C组：5×105m

6、L-1组+ePTFE膜；D组：5×106mL-1组+ePTFE膜；E组：5×107mL-1组+ePTFE膜。C，D，E组分别用不同浓度的SD大鼠BMSCs与BME10X胶原膜复合培养后植入缺损部位。A组为空白对照组，B，C组为低浓度组，D，E组为高浓度组。　　1.1.2主要材料　　DMEM低糖培养基（美国Gibco公司）；胎牛血清（美国Hyclone公司）；医用组织引导再生胶原膜BME10X（福建省博特生物科技有限公司）；膨体聚四氟乙烯膜（ePTFE膜，上海市塑料研究所）；瞬康医用胶（北京瞬康科技

7、发展有限公司）。　　1.2方法　　1.2.1SD大鼠BMSCs的分离培养　　采用　　3讨论　　牙周组织再生的基础是牙周韧带细胞（periodontalligmentcells,PDLCs），PDLCs是牙周治疗后形成牙周新附着的主要细胞来源，但在牙周病损部位其来源有限，限制了PDLCs作为种子细胞的临床应用，因此有必要寻找一种创伤小或无创伤即可得到的、繁殖能力强的、具有多向分化潜能的细胞用于修复牙周组织缺损。BMSCs来源丰富、取材方便，易于体外培养扩增，定向分化能力强，是组织工程研究中理想的种子细胞。Kra

8、mer等将BMSCs与牙周韧带共同培养7～21d，免疫组织化学和原位杂交结果表明BMSCs具有PDLCs的特征［7］：骨钙素和骨桥蛋白表达增强，骨涎蛋白表达减弱，提示BMSCs可用于牙周组织的再生和修复。刘琼等比较了BMSCs与正常人PDLCs表面抗原的表达情况，结果表明PDLCs与BMSCs在表面抗原的表达上相似，该结果可能支持牙周膜干细胞来源于骨髓细胞的假设［8］。因此使用适宜的BMSCs移植入