丝素蛋白结合骨髓基质干细胞诱导的成骨细胞修复骨缺损的实验分析

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2、交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。论文的公布(包括刊登)授权苏州大学学位办办理。研究生签名：之兰丛日导师签名：二江日期：立型≤：兰：。乒期：竺婴生：!!丝丝素蛋白结合骨髓基质干细胞诱导的成骨细胞修复骨缺损的实验研究前言骨缺损在临床上常见，目前常用的治疗方法有自体骨移植；异体骨移植和人工骨移植。自体骨移植虽然效果良好，但可造成自体新的骨缺损和创伤，引起取骨处的疼痛

3、和影响美观。而移植骨也可能因骨质吸收；感染而失败。异体骨移植有排移反应，并且可能传播疾病。单纯的人工骨移植疗效不确切，而组织工程的兴起为骨缺损的修复提供了新思路。组织工程是近年来发展起来的一门新学科，是一门利用工程学和生命科学原理，以生物材料为载体整合被分离细胞，并能在宿主体内降解释放细胞，形成新的有功能组织的学科。其基本方法是在体外分离培养相关细胞后将一定量的细胞种植到具有一定空间的三维支架上，再将此细胞支架复合物植入体内或在体外继续培养，通过细胞之间的相互黏附，生长繁殖分泌细胞外基质，从而形成具有一定结构和功能的组织器官。简

4、言之，组织工程就是制作新的组织以替换和再生体内组织，它在修复骨缺损方面有着明显的优点：(1)不受供体来源的限制。(2)可避免免疫排斥反应。(3)合成的组织功能好，能替代被修复组织。(4)材料可根据不同需要而改变。．组织工程研究内容主要有种子细胞，支架材料以及生长因子。理想的种子细胞应具有以下特点：(1)来源广泛：(2)体外培养时增殖，分化能力强，不易老化；(3)在细胞因子诱导下发生转化等。目前研究的丝秉蛋白结合骨髓基质干细胞诱导的成骨细胞修复骨缺损的实验研究前言种子细胞主要来自骨组织、骨膜、骨髓、早期胚胎和骨外组织。由于骨组织、

5、骨膜和早期胚胎来源有限、取材不便，骨外组织的成骨性能和机制不完全清楚，难以成为有前途的种子细胞来源。而骨髓来源充足，取材方便，自体细胞移植无免疫排斥反应，成骨能力确切，以往研究表明，连续扩增40代以上仍具有多向分化潜能，而且冻存复苏后培养传代15次仍具有多向分化潜能，有望采用骨髓基质干细胞(BMSCs)作为种子细胞与生物材料结合构建组织工程化骨，成为首选的骨组织工程种子细胞来源。细胞移植的支架材料应满足以下几个要求：(1)具有足够的机械强度支持细胞分化增生；(2)材料来源充足，易于重复制作，加工成型；(3)良好的生物相容性，其本

6、身及降解产物对细胞和机体无毒性，不会或较少引起炎症和免疫反应；(4)有适度的生物降解速度，该降解速度需和组织再生速度相匹配，最后可被完全吸收或完全排出体外；(5)良好的表面相容性，即材料表面具有足够的细胞吸附能力，有利于细胞的黏附和生长。支架材料的生物相容性和细胞黏附能力是支架材料性能中至关重要的。目前在组织工程中使用的合成高分子材料，主要是聚乳酸等脂肪族聚酯材料，它们在降解性等方面都基本上能满足支架材料的应用，但在生物相容性和细胞黏附能力方面却远不如天然高分子。应此，天然高分子材料或天然高分子改性材料成为支架材料的理想选择。本

7、课题通过体外分离培养同种异体兔的骨髓基质干细胞(BMSCs)并进行体外成骨细胞诱导，接种到丝素蛋自支架上，形成细胞载体复合物。丝素蛋白结合骨麓基质千细胞诱导的成骨细胞修复骨缺损的实验研究前言把细胞载体复合物种植于兔桡骨的骨缺损模型上，观察骨缺损修复情况。旨在探讨以丝素蛋白为支架以骨髓基质干细胞体外诱导的成骨细胞为种子细胞修复兔桡骨骨缺损的可行性，为骨组织工程探寻理想的种子细胞和支架材料。丝藁蛋白结合骨髓基质干细胞诱导的成骨细胞修复骨缺掼的实验研究第一部分骨髓基质干细胞的提取培养及体外诱导成骨细胞种子细胞是组织工程的基本要素之一，

8、如何在适宜的体外消化分离和培养条件下获得尽量多，活性高，分化功能良好的种子细胞是目前骨组织工程制备技术中的重要课题之一。骨髓基质干细胞是有多向分化潜能的干细胞，在特定的条件下可向成骨细胞；软骨细胞；成纤维细胞；肌腱细胞；脂肪细胞；成肌细胞；血管内皮细胞；肝细胞及