fhit在结直肠癌中的表达及其与caspase3、 pcna之间的关系论文

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1、FHIT在结直肠癌中的表达及其与Caspase3、PCNA之间的关系论文李铭,袁宏银,陈中安,邓文龙,廖红,刘铭球【摘要】目的探讨FHIT蛋白﹑Caspase3及PA在散发性结直肠癌(sporadiccolorectalcarcinoma,SCC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测92例SCC组织和28例正常结直肠组织中FHIT蛋白、Caspase3和PA的表达。结果(1)FHIT蛋白、Caspase3、PA在正常结直肠组织及SCC组织中的阳性表达均有显著性差异(P0.01)。(2)FHIT蛋

2、白、PA表达与SCC组织学分级、Duke’s分期、淋巴结转移、5年生存率相关(P0.01)。(3)Caspase3的表达同SCC组织学分级、5年生存率相关(P0.05)。(4)SCC组织中FHIT蛋白和Caspase3两者表达呈明显正相关;FHIT蛋白和PA表达呈明显负相关(P0.01)。(5)FHIT蛋白和Caspase3,FHIT蛋白和PA联合表达与SCC的组织学分级、Duke’s分期、淋巴结转移及5年生存率均有关(P0.05)。结论(1)FHIT蛋白、PA的表达与SCC的发生﹑恶性程度及预后有关;(2)Casp

3、ase3的表达与SCC的发生﹑预后有关;(3)联合检测FHIT蛋白、Caspase3及FHIT蛋白、PA可以用于筛查SCC的高危人群。【关键词】结直肠癌;FHIT蛋白;免疫组织化学;预后Keya;FHITprotein;Immunohistochemistry;Prognosis本研究采用免疫组织化学SP法检测92例散发性结直肠癌(sporadiccolorectalcarcinoma,SCC)和28例正常结直肠组织中FHIT蛋白、Caspase3和PA的表达,探寻三者的异常表达与SCC发生﹑恶性程度及预后的关系.f

4、reel正常结直肠组织28例。选取材料经HE染色。本组资料只收集了SCC的腺癌及粘液腺癌,腺癌按其组织分化的程度分为高、中、低分化,本研究将粘液腺癌归为低分化型。其中高分化癌27例、中分化癌39例、低分化癌26例;按Duke’s分期:A期26例、B期41例、C期25例。此外,92例SCC患者中,对2000年6月前的42例进行了5年随访,5年内死亡15例,5年生存率为64.3%。1.2免疫组化试剂兔抗人FHIT多克隆抗体,鼠抗人Caspase3单克隆抗体,鼠抗人PA单克隆抗体,均为即用型,购于北京中山生物技术有限公司;广谱

5、型SP试剂盒、DAB显色剂,购自福州迈新生物工程公司。1.3方法免疫组化采用SP法。一抗为兔抗人FHIT多克隆抗体、鼠抗人Caspase3单克隆抗体和鼠抗人PA单克隆抗体。生物素标记二抗,DAB显色,苏木素复染,以PBS替代一抗作阴性对照,以已知阳性片作阳性对照。具体步骤按试剂盒说明书进行操作。1.4免疫组织化学结果判断根据Hao等[1]以染色强度和染色范围来界定FHIT蛋白、Caspase3的表达,见图1、2,染色强度与阳性细胞百分比的乘积≥2分为免疫反应阳性(+),2分为阴性(-)。根据Garcia等[2]的标准评

6、估PA表达情况,见图3,阳性细胞表达26%为阳性,其他为阴性。1.5统计学方法采用卡方检验、Fisher精确概率法和Spearman相关分析2结果2.1正常结直肠组织及SCC组织中FHIT蛋白、Caspase3、PA的表达与临床指标的关系,见表1。2.2FHIT蛋白与Caspase3和PA表达的相关性92例SCC组织中,FHIT蛋白与Caspase3、PA表达相一致分别为64.1%(59/92)、25.0%(23/92),见表2。2.3FHIT蛋白、Caspase3联合表达与SCC组织分级、Duke’s分期、淋巴结

7、转移和5年生存率的关系FHIT蛋白、Caspase3联合表达在92例SCC组织中的具体情况见表3。统计学分析发现FHIT蛋白、Caspase3联合表达与SCC的组织学分级(χ2=14.4918,P=0.0138)、Duke’s分期(χ2=19.2255,P=0.0038)、淋巴结转移(χ2=12.6340,P=0.0015)和5年生存率(χ2=12.9892,P=0.0025)均有关。2.4FHIT蛋白、PA联合表达与SCC组织分级、Duke’s分期、淋巴结转移和5年生存率的关系FHIT蛋白、PA联合表达在92例SCC

8、组织中的具体情况见表4。统计学分析发现FHIT蛋白、PA联合表达与SCC的组织学分级(χ2=17.1352,P=0.0027)、Duke’s分期(χ2=34.8397,P0.0001)、淋巴结转移(χ2=12.0144,P=0.0025)和5年生存率(χ2=8.2000,P=0.0247)均有关。表1正

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