白背三七多糖的提取纯化及含量测定

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1、白背三七多糖的提取纯化及含量测定作者：姜曼花邱细敏刘胜姿彭胜黎强【摘要】　　目的确定白背三七多糖的最佳提取方案，对其多糖进行分离纯化和含量测定。方法建立正交实验，对其提取方案进行优化；通过Sevage法脱蛋白、乙醇沉淀以及DEAE－52柱层析进行分离纯化；蒽酮-硫酸法测定其总多糖含量。结果温度90℃，固料比1:9，提取时间2h；提取次数2次，所得多糖的含量最高。蒽酮-硫酸法测得粗多糖含量为1.49%；DEAE－52柱层析分离纯化分别得到组分Ⅰ、组分Ⅱ、组分Ⅲ。结论水提白背三七多糖工艺简便，投资少，有利实现工业化大生产。【关键词】白背三七多糖蒽酮-硫酸法　　Abstra

2、ct：ObjectiveTofixanopticalextractivemethodandtomakeseparation，purificationandcontentdeterminationofpolysaccharideinGynuradivaricata(L.)DC.MethodsOrthogonalexperimentumextractionprocessofGynuradivaricata(L.)DC.polysaccharide(GDPS）.Thepolysaccharidenchromatography.Tomakecontentdeterminati

3、onethodofanthranone-sulphuricacid.ResultsTheoptimalextractingconditionsperature90℃，theratioofsolidandliquid1:9；extractingtime2handextractingtnchromatography.ConclusionIt'ssimple,costlesstoextractpolysaccharideethod.　　Keyination　　白背三七Gynuradivaricata(L.)DC.为菊科三七草属植物，又名白(百)子菜，分布于台湾至华南、西南一

4、带，喜生于潮湿的阴地上［1］，根、茎、叶均可入药，其根及根茎味甘，性凉，有清热、凉血、散淤消肿之功效，用于咳嗽痰喘、肺痈、崩漏、烫伤、跌打损伤、刀伤出血等症；而茎叶味咸，微辛，性凉，有消热，舒筋及止血，祛淤的作用，用于镇咳、风湿性关节痛、骨折、创伤出血、痈肿疮疥等症。在民间则作为一种保健野菜，由于其能促进人体新陈代谢，增强体力，滋补强身，延年益寿而备受青睐。湖南岳阳地区众多糖尿病患者长期食用，有效控制了血糖升高，因不知植物名而被患者称为“救命草”。网上则称其为“神奇的植物”，也有称其为“明日叶”或“明日草”等。药理学研究表明，多糖(polysaccharide)是构成

5、生命的四大基本物质之一，多糖在增强免疫力［2］、降血糖、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗衰老、抗凝血等方面发挥着生物活性作用。因此对多糖的研究与开发已越来越引起人们的广泛关注。关于白背三七栽培技术　　2.4.4稳定性实验以标准系列4号管(即0.4ml标样管)作稳定性考察，在626nm处于0，30，60，90，120min测其吸光度。　　2.4.5加样回收实验精密称取已知多糖含量的样品4份，加水稀释至100ml，取0.1ml，加入240mg/L葡萄糖对照品溶液0.1ml，加水溶解并定容至100ml，取溶液适量，按“2.4.3”项下方法操作，626nm处测定吸收值，代入工作曲线方

6、程，将所得结果换算成质量，计算出回收率。　　2.4.6总多糖含量测定精密称取多糖0.2010g，溶解配成100ml溶液，取0.1ml同“2.4.3”项下方法处理，在626nm波长处测定吸光度，代入曲线回归方程得总多糖的浓度。　　3结果　　3.1正交实验结果见表2。　　通过正交实验可知：提取最佳条件为A2B3C1D2，即提取温度90℃，固料比1∶9，提取时间2h；提取次数2次时，提取效果最好。因素影响顺序分别为提取温度>固液比>提取次数>提取时间。　　表2正交实验结果（略）　　3.2多糖含量测定　　3.2.1标准曲线的绘制标准曲线有关数据见表3。　　表

7、3标准曲线绘制（略）　　以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程A=0.0051C+0.004r=0.9998，结果（表3）表明在24~192μg范围内葡萄糖含量与吸光度呈良好的线性关系.。白背三七样品吸光度为0.15703，将其代入回归方程得到C=30.0(μg/ml)。　　多糖的含量(％)=C×D×V］.北京:科技出版社，1974：416.　　［2］李丽立，张彬，朱南山，等.白术多糖对早期断奶仔猪部分免疫性能的影响［J］.农业现代化研究，2007，28(4):487.　　［3］梁萍.时尚野菜富贵菜高产栽培技术［J］.广西农学报，2006，23