白背三七多糖的提取纯化及含量测定

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1、白背三七多糖的提取纯化及含量测定姜曼花邱细敏刘胜姿彭胜黎强【摘要】　　目的确定白背三七多糖的最佳提取方案，对其多糖进行分离纯化和含量测定。方法建立正交实验，对其提取方案进行优化；通过Sevage法脱蛋白、乙醇沉淀以及DEAE－52柱层析进行分离纯化；蒽酮-硫酸法测定其总多糖含量。结果温度90℃，固料比1:9，提取时间2h；提取次数2次，所得多糖的含量最高。蒽酮-硫酸法测得粗多糖含量为1.49%；DEAE－52柱层析分离纯化分别得到组分Ⅰ、组分Ⅱ、组分Ⅲ。结论水提白背三七多糖工艺简便，投资少，有利实现工业化大生产。【关键词】白背三七多糖蒽酮-硫酸法　　Abstract：ObjectiveT

2、ofixanopticalextractivemethodandtomakeseparation，purificationandcontentdeterminationofpolysaccharideinGynuradivaricata(L.)DC.MethodsOrthogonalexperimentumextractionprocessofGynuradivaricata(L.)DC.polysaccharide(GDPS）.Thepolysaccharidenchromatography.Tomakecontentdeterminationethodofanthranone-sul

3、phuricacid.ResultsTheoptimalextractingconditionsperature90℃，theratioofsolidandliquid1:9；extractingtime2handextractingtnchromatography.ConclusionIt'ssimple,costlesstoextractpolysaccharideethod.　　Keyination　　白背三七Gynuradivaricata(L.)DC.为菊科三七草属植物，又名白(百)子菜，分布于台湾至华南、西南一带，喜生于潮湿的阴地上〔1〕，根、茎、叶均可入药，其根及根茎味甘，

4、性凉，有清热、凉血、散淤消肿之功效，用于咳嗽痰喘、肺痈、崩漏、烫伤、跌打损伤、刀伤出血等症；而茎叶味咸，微辛，性凉，有消热，舒筋及止血，祛淤的作用，用于镇咳、风湿性关节痛、骨折、创伤出血、痈肿疮疥等症。在民间则作为一种保健野菜，由于其能促进人体新陈代谢，增强体力，滋补强身，延年益寿而备受青睐。湖南岳阳地区众多糖尿病患者长期食用，有效控制了血糖升高，因不知植物名而被患者称为“救命草”。网上则称其为“神奇的植物”，也有称其为“明日叶”或“明日草”等。药理学研究表明，多糖(polysaccharide)是构成生命的四大基本物质之一，多糖在增强免疫力〔2〕、降血糖、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗衰老、

5、抗凝血等方面发挥着生物活性作用。因此对多糖的研究与开发已越来越引起人们的广泛关注。关于白背三七栽培技术文献报道较多〔3〕，化学活性成分仅见该植物吡咯啶生物碱〔4〕、黄酮类成分〔5，6〕及脂肪酸成分分析〔7，8〕的报道，尚未见其多糖的研究报道。本文报道白背三七多糖的提取纯化及含量测定。　　1器材　　1.1仪器UV-2501PC紫外分光光度计，DEAE-52层析柱　　1.2药材与试剂无水乙醇、浓硫酸、蒽酮、氯仿、正丁醇（均为分析纯）、葡萄糖标准品（国药集团化学试剂有限公司）、白背三七药材（岳阳市场上购买）。　　2方法　　2.1白背三七多糖的提取　　2.1.1提取温度的确定取已干燥的药材15g

6、，按药材：石油醚＝1:3进行脱脂，脱脂后的药材按1：7的比例，以水为溶剂，分别在不同的温度下提取2次，提取2h/次。　　2.1.2提取时间的确定取已干燥的药材15g，按药材：石油醚＝1:3进行脱脂，脱脂后的药材按1：7的比例，以水为溶剂，90℃下，不同持续提取时间下提取2次。　　2.1.3料液比的确定取已干燥的药材15g，按药材：石油醚＝1:3进行脱脂，脱脂后的药材90℃下，按不同的料液比提取2次，提取2h/次。　　2.1.4提取次数的确定取已干燥的药材15g，按药材：石油醚＝1:3进行脱脂，脱脂后的药材90℃下，提取2h/次，提取不同次数。　　2.1.5正交实验通过单因素实验确定最佳因

7、素水平，为了消除各因素间的相互影响，根据这些确定的因素，确定正交因素的各个水平。根据各实验因素水平即提取时间、提取温度、固液比、提取次数4因素3个水平按表1进行正交设计提取。见表1。　　表1因素与水平（略）　　2.2脱蛋白本实验采用sevage法脱蛋白，粗多糖加适量水溶解，加入1/5体积的sevage试剂（氯仿∶正丁醇=4∶1），强烈振摇30min。静置分层，除去交界处变性蛋白，重复处理3次。在200~400nm处扫描未见蛋白质吸收