不同提取方法赶黄草提取物清除dpph自由基的作用研究论文

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1、不同提取方法赶黄草提取物清除DPPH自由基的作用研究论文贺晓华，许龙，谈满良，杜方麓，曾建国【摘要】目的研究赶黄草提取物对DPPH自由基的清除作用。方法采用不同溶剂、不同提取方法制得赶黄草提取物，以抗坏血酸为对照，研究其对DPPH自由基的清除作用。结果不同溶剂提取物对DPPH自由基清除率强弱依次为95%乙醇水丙酮，不同极性部分对DPPH自由基清除率强弱依次为醋酸乙酯部分正丁醇部分水部分石油醚部分.freelPenthorumchinensePurshonscavengingDPPHfreeradical.MethodsTheDPPHscavengingactivities

2、ofPenthorumchinensePurshextractedbydifferentmethodsanddifferentsolventschinensePurshextractsobtainedfrom95%ethanolether.PenthorumchinensePurshextractandascorbicacidinacertainconcentrationhadthesameDPPHfreeradicalscavengingactivity.ConclusionTherefluxisthebestmethod,95%ethanolextracthasgoo

3、dactivitytoscavengetheDPPHfreeradical,andethylacetatethemoststrongseavengingactivitytoDPPHfreeradical.KeychinensePursh;DPPHfreeradical;Scavengingactivity赶黄草为虎耳草科扯根菜属PenthorumGronvexl植物扯根菜PenthorumchinensePursh的干燥地上部分［1］。赶黄草为苗族民间的草药，主要分布于四川、贵州、湖南等地，具有清热解毒、退黄利湿、活血散瘀、利水消肿之功效［2］。赶黄草中含有黄酮、有机酸、

4、挥发油等成分，其中没食子酸和槲皮素为赶黄草中有效成分［3］，具有抗乙肝病毒和保肝的作用。对于赶黄草清除DPPH自由基的活性研究及其抗氧化研究尚未见报道。衰老、癌症及炎症等疾病与体内脂质过氧化和自由基有直接关系，因为自由基可与生物体内的许多物质如脂肪酸、蛋白质等作用，夺取它们的氢原子，造成相关细胞的结构与功能的破坏，更重要的是其氧化产物和中间产物会伤害生物膜、酶、维生素、蛋白质及活细胞功能，其中一些还被认为是致癌物质，因此对消除自由基的探讨已得到普遍关注［4］。清除自由基的检测方法很多，如电子顺磁共振法、电子自旋共振法、化学发光法等，但这些方法大多需用昂贵的仪器，一般实验室

5、难以应用。DPPH分析法是一种筛选自由基清除剂，评价抗氧化活性的简便方法［5］。当有自由基清除剂存在时，由于其与DPPH中电子配对使DPPH液吸收逐渐消失，DPPH液褪色程度与配对电子数成化学计量关系，因而可用分光光度法进行定量分析。为了了解赶黄草的抗氧化性质，进而阐明其所具有的抗病毒保肝作用机制，本文对赶黄草提取物清除DPPH自由基的活性进行了研究。1仪器与试剂双光束紫外可见分光光度计TU-1901(北京普析通用仪器有限公司)，电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)，旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器有限公司)，电热恒温鼓风干燥箱(北京市永光明医疗仪器厂)，超声清洗仪(昆明市

6、超声仪器有限公司)，数显恒温水浴锅(江苏省荣华仪器制造有限公司)。二苯基苦味酰基苯肼(DPPH)，购自sigma公司。供试药材赶黄草2007-10下旬采自湖南浏阳，由湖南中医药大学周日宝教授鉴定为虎耳草科植物赶黄草PenthorumchinensePursh。2方法2.1赶黄草有效成分的提取2.1.1回流提取法准确称取药材10.0g，加入10倍量的溶剂，回流提取2h，重复两次，将提取液过滤，滤液真空浓缩至浸膏，干燥待用。2.1.2超声提取法准确称取药材10.0g，加入10倍量的溶剂，加热超声2h，重复两次，将提取液过滤，滤液真空浓缩至浸膏，干燥待用。2.1.3温浸法准确称

7、取药材10.0g，加入10倍量的溶剂，温浸2h，重复两次，将提取液过滤，滤液真空浓缩至浸膏，干燥待用。2.1.4不同极性溶剂萃取法准确称取药材50.0g，以“2.1.1”方法用75%乙醇提取两次，提取液经真空浓缩至小体积，依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取，所得各萃取部分浓缩成浸膏，干燥待用。2.2赶黄草提取物清除DPPH自由基能力的测定2.2.1清除率的测定精密称取8.0mgDPPH于50ml容量瓶中，用95%乙醇溶解；样品溶解于95%乙醇溶液中。取样品溶液1ml加入到离心管，再加入3ml的DPPH溶液配成样品溶液。95%乙