泽泻提取物自由基清除能力的研究

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1、泽泻提取物自由基清除能力的研究【摘要】　　目的研究泽泻提取物不同部分的自由基清除活性。方法采用有机溶剂萃取法和大孔树脂洗脱法将泽泻总提取物分为石油醚部分、醋酸乙酯部分、正丁醇部分、乙醇部分、乙醇洗脱部分和水提部分。分别考察对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)、DPPH自由基(DPPH·)和H2O2的清除效果。结果泽泻正丁醇部分在清除O2-·和H2O2能力较强，醋酸乙酯部分清除DPPH·较强，而泽泻水提部分清除·OH自由基能力较强，而且效果好于维生素C。结论泽泻正丁醇部分、醋酸乙酯部分和水提部分清除自由基能力强。【关键词】泽泻DPPH超氧阴

2、离子自由基羟自由基　　Abstract：ObjectiveToinvestigatefreeradicalscavengingactivityinvitroofdifferentpolarityfractionsofextractsfromAlismaorientalis.MethodsSixdifferentfractionstheextractofA.orientalisbyusingdifferentpolaritiesofsolvents,suchaspetroleumether,ethylacetate,n-butanol,ethanol,a

3、croporousresin.Accordingtoscavengingactivitiesforhydroxylradical(·OH),superoxidizedradical(O2-·),1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH·)radicalandH2O2,freeradicalscavengingactivitiesofdifferentpolarityfractionsinC.ConclusionThefractionsofethylacetate,n-butanolandaorientalis;DPPH;Su

4、peroxidefreeradical;Hydroxylradical　　泽泻系泽泻科植物泽泻Alismaorientalis(Sam.)Juzep.的干燥块茎,在历代本草和《中国药典》中均有收载。现代药效学研究表明,泽泻具有利尿消肿、抗脂肪肝、降血脂等作用〔1～3〕。有研究报道，泽泻总提取物能降低大鼠和兔血液中脂质过氧化产物MDA的含量，提高血液中抗氧化酶SOD活力，对于氧化应激/脂质过氧化损伤具有一定保护作用〔4〕。为了明确泽泻抗氧化的作用部位，笔者采用有机溶剂萃取法和大孔树脂洗脱法，将泽泻的总提取物分为石油醚部分、醋酸乙酯部分、正丁醇部分、乙醇部

5、分、乙醇洗脱部分和水提取部分，分别对提取物的各部分进行了清除羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH·自由基和H2O2效果的研究，为进一步探讨泽泻提取物的抗氧化性能提供依据。　　1器材　　泽泻，购自江西广昌,按中药炮制规范得到饮片,再粉碎得到20目颗粒；乙醇、石油醚、正丁醇、醋酸乙酯、邻苯三酚、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、HCl、Vc、FeSO4、双氧水、水杨酸、DPPH·均为分析纯。　　T6型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司），N-1001型旋转蒸发仪（东京理化公司），TDL-5型低速台式离心机（上海安亭科学仪器厂），AR5120型电子天平

6、（美国奥豪斯公司）。　　2方法　　2.1泽泻提取物的制备取泽泻颗粒，去离子水提取，浓缩，提取液乙醇醇沉，静置24h，5000r/min离心10min,取上清液，浓缩到原体积的1/4后，分别用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取。最后将萃取水相过大孔树脂，用95%乙醇洗脱，分别得到泽泻水提部分、醇提部分、石油醚部分、醋酸乙酯部分、正丁醇部分和乙醇洗脱部分6个部分，将各部分浓缩后，配成一定浓度溶液，放置备用。　　2.2超氧阴离子自由基〔5〕的清除邻苯三酚在弱碱条件下发生自氧化，产生O2-·。O2-·清除剂能使邻苯三酚自氧化产物在325nm处的吸收峰减弱，通过吸光值

7、A325的变化率计算对O2-·的清除能力。取4ml0.05mol/LTris-HCl缓冲液（pH8.2），置于25℃水浴中预热20min，分别加入1ml待测液和1ml25mmol/L邻苯三酚溶液，混匀后于25℃水浴中反应5min，加入0.1ml8%的HCl终止反应，在325nm处测A值，以1ml蒸馏水代替待测液作空白试验。以维生素C作阳性对照。　　清除率(P)=〔A3-(A1-A2)〕/A3×100%　　其中A1为某浓度的泽泻提取物吸光值，A2不加入邻苯三酚无显色时的吸光值，A3不加泽泻提取物的吸光值。　　2.3羟自由基〔6〕的清除利用Fe2+与H2O

8、2混合产生·OH，以·OH氧化水杨酸所得产物的吸光值表示·OH的多少，吸光值越大，·OH越多。