黑果枸杞叶片甲醇提取物清除自由基活性的研究论文

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1、黑果枸杞叶片甲醇提取物清除自由基活性的研究论文白红进，周忠波杜红梅，徐卿棚【摘要】目的测定黑果枸杞叶片甲醇提取物对DPPH自由基、羟自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O·-2）的清除能力。方法采用DPPH法、水杨酸法、邻苯三酚自氧化法分别测定黑果枸杞叶片甲醇提取物清除DPPH自由基、羟自由基和超氧自由基的能力。结果在实验条件下，黑果枸杞叶片甲醇提取物对超氧阴离子，羟自由基，DPPH自由基均有不同程度的抑制作用,.freeltheleafofLyciumrutheniumMerr.onDPPHfreeradical,hydroxylfreeradical(·

2、OH)andsuperoxidefreeradical(O·-2)．MethodsThemethodsofDPPH·，SalicylicAcidandpyrograllolauto-oxidationtheleafofL.rethenicumMurr.onthethreefreeradicals.ResultsTheextractshoent，andthehighestfreeradicalscavengingrateofdifferentfreeradicalethanolextractoftheleafofL.rethenicumMurrshoruthe

3、nicumMurr；Freeradical；Antioxidation黑果枸杞LyciumruthenicumMurr.系茄科(Solanaceae)枸杞属(Lycium)植物，是我国西北地区常见的野生盐生植物，其浆果果实成熟后为圆形，呈深黑色可用于治疗心热病、心脏病、月经不调、停经等病症［1］。其营养成分与宁夏枸杞相似［2］。《维吾尔药志》记载，维吾尔医常用黑果枸杞果实及根皮治疗尿道结石、癣疥、齿龈出血等症，民间作滋补强壮以及降压药［3］。近年来对黑果枸杞的研究主要集中在果实色素方面，对黑果枸杞其它部分的研究较少，关于叶片中的化学成分和生物活性研究未见文献

4、报道。本实验通过体外实验，对黑果枸杞叶片甲醇提取物抗氧化活性进行了初步检测，为黑果枸杞的综合开发利用提供依据。1器材与方法1.1材料黑果枸杞叶片于200607采自新疆塔里木盆地，经阴干、粉碎、密封保存。1.2仪器与试剂1.2.1仪器SartoriusBS210S电子天平（北京塞多利斯天平有限公司）；旋转蒸发仪（上海申生科技有限公司）；DHG－9101－2SA型电热恒温鼓风干燥箱；ZP－200振荡器（江苏太仓市实验设备厂）；超纯水仪（美国Millipore公司）；T6-紫外可见分光光度计（北京普析通用有限公司）；centrifuge5415D型离心机（德国艾

5、本德股份公司（EppendorfAG））。1.2.2试剂二苯代苦昧酰基自由基(DPPH·)（Sigma公司）；维生素C、维生素E；0.1mol/LTris-HCl缓冲液（pH8.2，内含2mmol/LEDTA）、邻苯三酚（60mmol/L）、甲醇、乙醇、盐酸、H2O2、FeSO4、水杨酸等均为国产分析纯。1.3样品的制备称取干燥黑果枸杞叶片100g，加甲醇2000ml，在常温下置于振荡器上（50r/min）提取2次，24h/次，过滤，合并滤液，减压浓缩，浓缩液置于50℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥，得供试样品。1.4抗氧化性实验1.4.1样品对DPPH自由基的清

6、除实验DPPH溶液的配制：准确称取7.88mgDPPH，用无水乙醇溶解并定容于100ml容量瓶中，DPPH浓度为2×10-4mo1/l，避光保存(0～4℃)。将样品粉末用甲醇配成10mg/ml溶液，倍比稀释为5，2.5，1.25，0.625mg/ml溶液。分别取样品溶液2ml与2×10－4mol/LDPPH溶液2ml均匀混合，在黑暗中放置30min，以甲醇为空白在525nm处测定其吸光度A，并以下式计算其清除率：清除率（%）=［1－（Ai－Aj）/Ac］×100%式中：Ac：2ml甲醇加2mlDPPH溶液的吸光度；Ai：2ml待测液加2mlDPPH溶液的吸光

7、度；Aj：2ml待测液加2ml甲醇的吸光度。按照上面公式计算清除率，清除率越大抗氧化能力越强。1.4.2样品对羟自由基的清除实验参照陈留勇等［4］改动的Smirnoff（1989）的水杨酸法，并略作改动。利用H2O2与Fe2＋混合产生羟自由基，即：H2O2＋Fe2＋→·OH＋H2O＋Fe3＋。再在体系中加入水杨酸捕捉羟自由基并产生有色物质，该物质在510nm处有最大吸收。用该吸光度值来表示羟自由基的含量。反应体系中含有8.8mmol/LH2O21ml，9mmol/lFeSO41ml，9mmol/L水杨酸－乙醇1ml，待测溶液1ml，其中H2O2是最后加入并启

8、动整个反应。37℃反应30min后，12000r/m