泽泻提取物自由基清除能力的研究论文

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1、泽泻提取物自由基清除能力的研究论文【摘要】目的研究泽泻提取物不同部分的自由基清除活性。方法采用有机溶剂萃取法和大孔树脂洗脱法将泽泻总提取物分为石油醚部分、醋酸乙酯部分、正丁醇部分、乙醇部分、乙醇洗脱部分和水提部分。分别考察对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)、DPPH自由基(DPPH·)和H2O2的清除效果。结果泽泻正丁醇部分在清除O2-·和H2O2能力较强，醋酸乙酯部分清除DPPH·较强，而泽泻水提部分清除·OH自由基能力较强，而且效果好于维生素C。结论泽泻正丁醇部分、醋酸乙酯部分和水提部分清除自由

2、基能力强。【关键词】泽泻DPPH超氧阴离子自由基羟自由基Abstract：ObjectiveToinvestigatefreeradicalscavengingactivityinvitroofdifferentpolarityfractionsofextractsfromAlismaorientalis.MethodsSixdifferentfractionstheextractofA.orientalisbyusingdifferentpolaritiesofsolvents,suchaspetroleumet

3、her,ethylacetate,n-butanol,ethanol,acroporousresin.Accordingtoscavengingactivitiesforhydroxylradical(·OH),superoxidizedradical(O2-·),1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH·)radicalandH2O2,freeradicalscavengingactivitiesofdifferentpolarityfractionsinC.ConclusionThe

4、fractionsofethylacetate,n-butanolandaorientalis;DPPH;Superoxidefreeradical;Hydroxylradical泽泻系泽泻科植物泽泻Alismaorientalis(Sam.)Juzep.的干燥块茎,在历代本草和《中国药典》中均有收载。现代药效学研究表明,泽泻具有利尿消肿、抗脂肪肝、降血脂等作用［1～3］。有研究报道，泽泻总提取物能降低大鼠和兔血液中脂质过氧化产物MDA的含量，提高血液中抗氧化酶SOD活力，对于氧化应激/脂质过氧化损伤具有一定保护作

5、用［4］。为了明确泽泻抗氧化的作用部位，笔者采用有机溶剂萃取法和大孔树脂洗脱法.freelin离心10min,取上清液，浓缩到原体积的1/4后，分别用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取。最后将萃取水相过大孔树脂，用95%乙醇洗脱，分别得到泽泻水提部分、醇提部分、石油醚部分、醋酸乙酯部分、正丁醇部分和乙醇洗脱部分6个部分，将各部分浓缩后，配成一定浓度溶液，放置备用。2.2超氧阴离子自由基［5］的清除邻苯三酚在弱碱条件下发生自氧化，产生O2-·。O2-·清除剂能使邻苯三酚自氧化产物在325nm处的吸收峰减弱，通过吸光值A32

6、5的变化率计算对O2-·的清除能力。取4ml0.05mol/LTris-HCl缓冲液（pH8.2），置于25℃水浴中预热20min，分别加入1ml待测液和1ml25mmol/L邻苯三酚溶液，混匀后于25℃水浴中反应5min，加入0.1ml8%的HCl终止反应，在325nm处测A值，以1ml蒸馏水代替待测液作空白试验。以维生素C作阳性对照。清除率(P)=［A3-(A1-A2)］/A3×100%其中A1为某浓度的泽泻提取物吸光值，A2不加入邻苯三酚无显色时的吸光值，A3不加泽泻提取物的吸光值。2.3羟自由基［6］的清除

7、利用Fe2+与H2O2混合产生·OH，以·OH氧化水杨酸所得产物的吸光值表示·OH的多少，吸光值越大，·OH越多。反应试管中加入0.5ml9mmol/LFeSO4，0.5ml9mmol/L水杨酸-乙醇溶液及1ml不同浓度的泽泻提取物，最后加5ml9mmol/LH2O2启动反应。37℃温浴1h，于510nm处测A值。以维生素C作阳性对照。清除率(P)=［A3-(A1-A2)］/A3×100%其中A3为对照不加泽泻提取物的吸光值；A1为某浓度泽泻提取物的吸光值；A2为无显色剂时的该浓度的本底值。2.4DPPH·自由基［

8、7］的清除DPPH·是一种稳定的自由基，与抗氧化剂发生反应，提供H·被还原，颜色由深紫色变为淡黄色，当有自由基清除剂存在时，DPPH的单电子被配对而使颜色变浅，变浅的程度与配对电子数成化学计量关系，因此，我们可以通过吸光度的测定来检测自由基的清除情况,从而评价试验样品的抗氧化能力。按照Larrauri方法，2ml新配制的20mmol/LDPPH·溶液中加入2