脑脉通对骨髓干细胞动员保护大鼠脑缺血损伤的影响

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1、脑脉通对骨髓干细胞动员保护大鼠脑缺血损伤的影响作者：李建生刘敬霞张新峰任伟宏田玉收王丁超【摘要】　　目的研究脑脉通对脑缺血大鼠骨髓干细胞动员(BMSCs)在血液和脑组织的变化及脑保护作用的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、脑脉通组、动员组、脑脉通+动员组，线栓法制备MCAO动物模型。皮下注射人重组粒细胞集落刺激因子(rGCSF)；脑脉通灌胃用药。检测大鼠外周血SCs进入外周血并向脑组织归巢，峰值时间存在差异；GCSF可使BMSCs分布增加；脑脉通使动员后血液和脑组织BMSCs增多、脑组织峰值时间延长，且使其脑保护作用增强。【关键词

2、】脑缺血；脑脉通；粒细胞集落刺激因子；骨髓干细胞　　【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectofNaomaitongonmobilizationofbonemarrocells(BMSCs)inbloodandbraintissueandtheroleinprotectingbraininratsia.MethodsRatslydividedintodifferentgroups.Middlecerebralarteryocclusion(MCAO)modelobilizationandmodelinist

3、ratedaitonginistration.On2,3,7and14dafteroperation,ratsbloodinalaorta,thenined.ExpressionofCD34+cellsinratsbraintissueeasured.ResultsRatsmortalityincreasedafteroperationandthedecreasesoforeobvious.paredtomodelgroups,decreasesofodelgroupincreasedobviouslyandshooreobvious.In

4、parisonobilizationgroups,ratsSCscouldenterperipheralbloodandmovetoiaandthepeakisdifferent.rGCSFcouldmakeBMSCsincreasebothinperipheralbloodandbrain.MeanaitongcouldincreaseBMSCsobilizedandmakethepeakofBMSCsinbrainprolong,asia.　　【Keyia;Rats;Naomaitong;GCSF;BMSCs　　骨髓干细胞(BMSC

5、s)是具有自我更新和多向分化潜能的原始骨髓细胞，可分化为主要的几类神经细胞，被用于脑组织损伤的保护和修复〔1〕。因符合机体自身的反应性修复机制，方法简便、安全且可避免异基因移植的免疫排斥反应，BMSCs动员在脑缺血损伤的应用方面显示良好前景〔2，3〕。粒细胞集落刺激因子(GCSF)是BMSCs有力的动员剂，可使脑缺血损伤后外周血和脑组织的BMSCs增加，并使其保护脑组织的作用增强。中药在骨髓干细胞动员保护脑组织受损方面研究有待进一步探索。我们前期研究发现，中药脑脉通(由大黄、人参、川芎、葛根组成)可增强BMSCs移植后的脑保护作用〔4〕，

6、本研究拟就其对BMSCs动员后的分布变化及抗脑缺血损伤作用的影响进行探讨，为中药在BMSCs动员治疗脑缺血方面的应用提供依据。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1实验动物　　SD大鼠，SPF级，雌雄各半，3～4月龄，体重(300±50)g，202只，由河南省实验动物中心提供〔合格证号：scxk(豫)20050001〕。　　1.1.2药物与试剂　　人重组粒细胞集落刺激因子注射液(rGCSF，商品名瑞白，山东齐鲁制药厂，规格：150μg/支)；荧光标记单克隆抗体CD34+(SantaCruz产品)；羊抗大鼠IgG生物素(BA100

7、5)、柠檬酸盐缓冲液(AR0024)、正常山羊血清封闭液(AR0009)、DAB显色试剂盒(AR1022)均由武汉博士德生物工程有限公司提供；脑脉通颗粒(出膏率15%，由大黄、人参、川芎、葛根组成；河南中医学院药物分析学科提供，5g/袋)。　　1.1.3主要仪器　　流式细胞仪(BeckmanCoulterEpics，XL)；数码相机(SonyCorpatation，Japan，型号：DSCF7172002)；光学显微镜(OlympusopticalCo.LTD，japan，型号：PM10AD)；透射电子显微镜(Hitachi，Japan

8、，型号H7500)；图像分析系统ImageProplus5.1(MediaCybericsInc，USA，型号41N510044800)。　　1.2方法　　1.2.1实验分