cdk4、p16在中耳胆脂瘤中的表达及意义论文

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1、CDK4、P16在中耳胆脂瘤中的表达及意义论文【摘要】观察细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子P16在中耳胆脂瘤上皮的表达情况，探讨它们在胆脂瘤发病机制中的作用。方法：采用免疫组织化学技术SABC法检测CDK4、P16在中耳胆脂瘤35例、正常外耳道皮肤20例中的表达，并结合胆脂瘤对听小骨骨质破坏程度，采用SPSS11.5软件进行统计学分析。结果：CDK4、P16均表达于胆脂瘤上皮的棘细胞层、颗粒层和角质层，阳性率分别为68.6%、88.6%，高于对照组(前者P=0.011,后者P=0.02)。二

2、者在胆脂瘤上皮的表达有一定的相关性，P＜0.05;与中耳胆脂瘤听小骨骨质破坏程度之间无明显相关性，P＞0.05。结论：CDK4与P16在中耳胆脂瘤发生中是共同而非单独起作用的.freelanmiddleearcholesteatomaandtoexploretheirrolesinthedevelopmentofcholesteatoma.Methods:ThirtyfivecholesteatomastissuesandtalhumanexternalearcanalskinensmunohistochemicalS

3、ABCmethodtodetecttheexpressionofCDK4andP16.Correlationsbetainlyintheprickleandgranularlayersofcholesteatomaepithelium.Theirpositiveratesalexternalearcanalepitheliumandthecholesteatomaepithelium（P=0.011,P=0.02）,andapositivecorrelationbetagroup(P＜0.05).Thestatistic

4、alresultsindicatedthattheexpressionofCDK4andP16didnotrelatedtotheextentofossiculardamageincholesteatoma(P＞0.05).Conclusion：CDK4andP16areoverexpressedinhumanmiddleearcholesteatomaepitheliumandpositivelycorrelateentofcholesteatoma.Thecholesteatomaepitheliumhasahyp

5、erproliferationabilityandamechanismofinhibitingtheproliferation.Theresultofimmunohistochemicalexaminationisnotrelatedtothedegreeofossiculardestruction.［KEY柠檬酸高温高压抗原修复，自然冷却后蒸馏水洗2次×3?min，PBS洗2次×3?min；滴加抗原修复液Ⅰ10?minPBS洗3次×3?min；滴加正常山羊血清封闭液20?min甩去多余液体，不洗；滴加稀释后的一抗（C

6、DK4及P16稀释倍数均为1∶200），4?℃过夜；PBS洗3次×3?min；滴加生物素化山羊抗兔IgG，20?℃20?min后PBS洗3次×3?min；滴加SABC，20?℃20?minPBS洗4次×5?min；DAB（3，3′二氨基联苯胺4盐酸）室温下显色，镜下控制反应时间；蒸馏水洗涤，苏木素复染，脱水，透明，中性树胶封固，显微镜观察。1.4结果判断细胞不着色，或呈浅棕色的背景颜色为阴性表达。细胞内棕黄色或褐色颗粒为阳性表达。于400倍视野下随机选取5个不相重叠的着色视野进行观测，参照shimizu改良法［7］进行结

7、果判定及评分：（1）显色程度：基本不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；（2）显色数量：无阳性细胞为0分，阳性细胞占计数细胞总数比例小于1/3为1分，1/32/3为2分，2/3以上为3分。结合显色程度及数量进行综合判断，计算二者相加得分，取平均值，小于3分为（-，阴性），3分为（+，弱阳性），4分为（，中等阳性），5分为（），6分为（），及为强阳性。1.5统计学处理采用SPSS11.5版软件包进行分析。组间阳性率及表达强度的比较采用ChisquareTest，必要时用Fisher精确概率法。

8、两两指标间相关性分析采用SpearmanRankCorrlation检验，所有结果均以P＜0.05为差异有统计学意义。2结果CDK4在实验组与对照组的阳性表达都位于细胞浆，呈棕黄色颗粒状。在中耳胆脂瘤上皮中弥漫性分布于基底层以上各层，靠近基底层的部分细胞表达较弱（封三彩图1）。而对照组CDK4表达位于棘细胞层及颗粒层