参芪补血冲剂多糖含量的测定

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1、参芪补血冲剂多糖含量的测定作者：辛春艳，秦向阳，何炜，李晓晔【关键词】参芪补血冲剂；,,分光光度法；,,果糖　　摘要：目的建立测定参芪补血冲剂多糖的含量的方法。方法于486nm波长处用分光光度法测定参芪补血冲剂中果糖的含量。结果果糖在10～60μg/ml之间与溶液吸光度值线性关系良好，r=0.999，果糖的平均加样回收率为102.2%，RSD为0.82%(n=5)。结论方法简便、快捷、可靠性高，准确性和重现性好，可用于复方制剂质量控制。　　关键词：参芪补血冲剂；分光光度法；果糖　　　Abstract：ObjectiveTodevelopamethodfordetermina

2、tionofPolysaccharideinShenqibuxueGranule.MethodsThecontentofsolublePolysaccharideinedbyspectrophotometryatthe.ResultsBetlandtheopticaldensity,thereexistedagoodlinearrelationship(r=0.999,n=6).Theaveragerecoveryoftheaddedsampleethodisconvenient,economic,accurateandreproducible,andcanbeusedfo

3、rquantitativeanalysisofPolysaccharideinShenqibuxueGranule.　　Keyetry;Fructose　　参芪补血冲剂由熟地黄、黄芪、党参等中药组成，具有益气养血、滋阴健脾之功效；主治贫血、放射和化疗等引起的白细胞、血小板减少等血虚证。近年来，对于多糖在抗癌、提高免疫、抗病毒、抗炎、降血糖、降血脂、抗氧化作用、抗衰老、骨折愈合和抗贫血等方面都呈现出喜人的效果，国内外学者已作了大量研究工作［1］。参芪补血冲剂中的各味药材熟地黄［2］、黄芪［3］、党参［4］等的多糖类成分的免疫活性对造血功能的影响，国内的学者也做了大量的研究，结

4、果表明多糖能使正常及化疗小鼠骨髓、脾及外周血中的造血干细胞有不同程度的增加［3］。因此，我们将果糖作为参芪补血冲剂的质量控制标准之一。对于多糖的含量较为经典的测量方法是苯酚-硫酸法［5］，但该方法用于测定复方制剂中多糖含量的报道较少。本实验用分光光度法测定参芪补血冲剂多糖的含量，以期为复方制剂质量控制的量化方法提供参考依据。　　1器材　　BECKMANDU640型分光光度计（美国），ZD85型恒温振荡器（国产），SK250LH型超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）。果糖对照品：中国药品生物制品检定所，批号100231200303；参芪补血冲剂由第四军医大学化学教研室研制

5、；活性炭、硫酸、苯酚（AR）。　　2方法与结果　　2.1测定波长的选定以浓度为40μg/ml的果糖标准品溶液显色后在200～800nm范围内进行扫描，扫描结果表明，其最大波长位于486nm处，因此本实验选用486nm作为测定波长。　　2.2供试品溶液的制备取参芪补血冲剂粉末样品2.0g,精密称定，置于100ml圆底烧瓶中，加水50ml，称定活性炭2.0g，密塞，超声10min，静置，过滤提取液，然后定容至100ml容量瓶中，得到水溶性糖制备液。　　2.3线性关系的考察将果糖标准品于70℃下，减压恒重4h，精密称取置于10mg容量瓶中，加水至刻度，配成浓度为100μg/ml标

6、准品溶液。在7个100ml的容量瓶中，用移液管分别移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml的果糖标准品溶液，然后用水定容至10ml，摇匀。将上述溶液分别转移至100ml干燥的圆底烧瓶中，加入50%的酚水溶液1ml摇匀，再各加入30ml浓硫酸，于恒温振荡器中在25℃条件下振荡20min，静置10min。用1cm比色皿，以试剂为空白，于486nm波长处测定吸光度。得回归方程A=0.02+0.0085C,r=0.999。　　2.4样品测定取制备得到的样品溶液1ml置于100ml容量瓶中，加水至刻度。然后取部分该样品用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液2ml，按2.3

7、项下方法操作，测定样品溶液的吸光度，计算样品中果糖的含量。结果见表1。　　表1参芪补血冲剂中果糖的含量测定（略）　　2.5精密度实验取质量浓度为100μg/ml果糖标准品溶液2ml，按2.3项下方法操作，连续6次测定溶液的吸光度，结果测得果糖标准品溶液吸光度RSD为0.2%，表明仪器有很好的精密度。　　2.6稳定性实验取上述制备的供试品溶液，室温放置，在0，2，4，6，8h内各测定1次吸光度。结果表明，供试品溶液8h内稳定，RSD为0.46%。　　2.7重现性实验取同一批参芪补血冲剂粉末样品6份，每份2.0g，依2