泰山四叶参多糖的提取及含量测定论文

《泰山四叶参多糖的提取及含量测定论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、泰山四叶参多糖的提取及含量测定论文王德才，李同德，高丽君【摘要】目的从泰山四叶参中提取多糖并测定多糖含量。方法经脱脂、醇提后，用水提醇沉法提取多糖，用苯酚-硫酸法测定其含量。结果泰山四叶参中多糖含量为12.45%，平均回收率为99.12%，RSD=1.49%（n=4）。结论泰山四叶参多糖含量较高，具有开发利用价值。【关键词】四叶参；多糖；提取Abstract：ObjectiveToextractthepolysaccharideandmeasurethecontentinRadixCodonopsisLanceolataefromMountainTaishan.Meth

2、odsThepolysaccharideethod,andthepolysaccharidecontenteasuredethod.ResultsThepolysaccharidecontentinRadixCodonopsisLanceolataeMountainTaishancontainsplentifulpolysaccharide,andithasmucheconomicvalue.Keyination四叶参CodonopsislanceolataBenth.etHook.F.又名轮叶党参、羊乳、山胡萝卜等.freell左右。以每100ml浓缩液加20ml氯仿

3、正丁醇（4：1）液，剧烈振荡30min，以4000r·min-1离心15min，去除下层氯仿及中层变性蛋白，取上部水层再重复去蛋白操作，至无明显中层为止。收集去蛋白后的上部水层，加无水乙醇至溶液含醇量达80％，静置过夜，以4000r·min-1离心15min，收集沉淀物，再依次用95％乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤各2次，得多糖粗品。再以水－乙醇重结晶纯化2次，60℃烘干，得白色粉末状精制泰山四叶参多糖8.26g，得率5.51％。2.2标准曲线的制备2.2.1葡萄糖标准溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品100mg，加适量水溶解，转移至100ml容量瓶中，

4、加蒸馏水至刻度，摇匀，配成1mg·ml-1葡萄糖标准液备用。2.2.25％苯酚溶液的配制取苯酚100g，加铝片0.1g和碳酸氢钠0.05g，常压蒸馏，收集182℃馏分10g，加蒸馏水200ml溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。2.2.3标准曲线的制作分别吸取葡萄糖标准液10，20，40，60，80，100μl置于大试管中，各补加蒸馏水至2.0ml，葡萄糖浓度分别为5，10，20，30，40，50μg·ml-1，然后各加入5％苯酚溶液1ml，缓慢沿壁加浓硫酸5ml，混匀，放置5min后，再沸水浴加热15min，流水冷却至室温，在波长490nm处测定吸光度。以蒸馏水代替葡萄糖溶液

5、作空白对照。结果表明，葡萄糖浓度在5～50μg·ml-1范围内，吸光度与浓度具有良好的线性关系。以浓度（C,.freell-1）为纵坐标，吸光度（A）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：C=3.3091＋71.4528A，r=0.9964。2.3换算因子的测定精密称取干燥至恒重的精制泰山四叶参多糖20mg，置100ml容量瓶中加蒸馏水，定容至刻度，作为多糖储备液。精密吸取多糖储备液0.2ml3份，按标准曲线制作方法测定其吸光度。经测定，3份多糖储备液平均吸光度为0.162，从回归方程中求出多糖液中折合葡萄糖的浓度为14.88μg·ml-1。按下式计算换算因子：F=l-1

6、），D为稀释因素。测得F=1.3441。2.4泰山四叶参多糖含量的测定精密称取泰山四叶参粉末0.5g3份，分别置圆底烧瓶中加80％乙醇150ml回流提取2h，趁热抽滤，滤渣用80％乙醇洗涤3次。然后滤渣连同滤纸置烧瓶中，加蒸馏水150ml，95℃水浴加热提取2h，趁热抽滤，用热水洗涤烧瓶和滤渣，洗液并入提取液中，待冷后转移于250ml容量瓶中，补加蒸馏水定容至刻度，如此制作样品溶液3份，置冰箱中备用。精密吸取样品溶液0.2ml，按标准曲线制作方法测定其吸光度。每份样品溶液重复操作2次，取平均吸光度。3份样品溶液的平均吸光度分别为0.218，0.209，0.212，平均0

7、.213。从回归方程中求出样品溶液中折合葡萄糖浓度为18.53μg·ml-1。按下式计算四叶参中多糖的百分含量。多糖含量（％）＝C·D·F/l-1），D为稀释因素。计算泰山四叶参中多糖含量为12.45％。2.5回收率测定采用加样回收法。取样品溶液0.2ml4份，分别加入葡萄糖标准液10，20，40，60μl，按标准曲线制作方法测定其吸光度，根据葡萄糖的检出量，计算其回收率。回收率（％）＝（实验测值－供试品液多糖量）/葡萄糖加入量×100％。测得平均回收率为99.12％，RSD＝1.49％（n=4）。2.6稳定性实验将供试品溶液完成显色后，