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时间:2018-11-19
《丹参酮ⅱa对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、丹参酮ⅡA对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制作者:李浩,刘开祥,俸军林,曾爱源,唐永刚【摘要】 目的探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对缺血再灌注损伤大鼠保护作用及对额顶部皮质中性粒细胞浸润、自由基含量、能量代谢的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、TanⅡA低剂量治疗组和TanⅡA高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。TanⅡA高、低剂量治疗组于术前连续灌胃给药3d,1次/d。用生化法观察缺血90min再灌注24h大鼠额顶部皮质髓过氧化物酶(MPO)活性、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量、三磷酸腺苷
2、(ATP)含量及脑含水量变化,并进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测脑梗塞体积。结果TanⅡA治疗组脑梗塞体积较缺血再灌注组减小,高、低剂量组之间差异亦具有显著性(P<0.05);与缺血再灌注组比较,TanⅡA治疗组显著降低MPO活性、MDA含量,增加SOD、ATP含量,降低脑组织含水量,高、低剂量组之间差异亦具有显著性(P<0.05)。结论TanⅡA对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与减轻缺血再灌注损伤炎症反应,减轻氧化性损伤和改善能量代谢有关。【关键词】缺血再灌注;髓过氧化物酶;自由基;三磷酸腺苷;
3、丹参酮Ⅱ Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofTanshinoneⅡA(TanⅡA)onneutrophilsinfiltrationandthecontentsoffreeradicalandATPinischemicfrontalandparietalcortexofcerebralischemiareperfusion(I/R)rats.MethodsInthisexperiment,ratslydividedinto4groups,namelyshamoperatedgroup,I/Rgro
4、up,loiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)modeladebysuture-occludedmethod.RatsinMCAOfolloicfrontalandparietalcortexe.Resultsparedeinloanner(allP<0.05).paredayaueviatecerebralischemia-reperfusioninjurybydecreasingtheinflammationreaction,freeradicalsandthedisbanlanceofener
5、gymetabolism. Keyia-reperfusion;Myeloperoxidase;Freeradical;ATP;TanshinoneⅡA丹参SalviamiltorrhizaBge为唇形科多年生草本植物,是我国传统具有活血化淤作用的中药,已被广泛用于心脑血管疾病的治疗,但其作用机制尚不十分清楚。丹参酮(Tanshinone)是丹参的有效活性组分,其中丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)为丹参酮中含量最高的活性成分。本实验采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,研究丹参酮ⅡA对大鼠脑缺血再灌注损伤缺血区额顶部皮质中
6、性粒细胞浸润、自由基含量、能量代谢、脑组织含水量及梗塞体积变化的影响,探讨其对脑再灌注损伤保护作用机制。 1材料与方法 1.1药品与试剂 TanⅡA由提供上海第一生化药业有限公司提供,纯度85%。髓过氧化物酶(MPO),丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。TTC购自中国医药集团上海化学试剂公司。 1.2动物分组及给药方法 健康PO活性的测定 再灌注24h,将大鼠开颅取脑,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左侧距离嗅球尖端7~11mm之间的额顶部皮质,以试剂盒提供的匀浆介质制成脑组织匀浆
7、。严格按试剂盒说明书步骤要求操作,计算出MPO活力单位。 1.5MDA和SOD的测定 再灌注24h,将大鼠开颅取脑,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左侧距离嗅球尖端7~11mm之间的额顶部皮质,以试剂盒提供的匀浆介质制成脑组织匀浆(步骤和方法同上)。严格按试剂盒说明书步骤要求操作,计算出MDA和SOD含量。 1.6三磷酸腺苷(ATP)含量测定 再灌注24h,将大鼠开颅取脑,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左侧距离嗅球尖端7~11mm之间的额顶部皮质,迅速加入乙腈,混匀,冰浴离心脱蛋白,离心后取上清液水系滤膜过滤后,-86℃保存。
8、用高效液相测定ATP含量。 1.7脑含水量检测 再灌注24h,各组随机取5只大鼠,断头取脑后,快速称取左右大脑半球湿重,置110~115℃烤箱内烤至恒重,再分别称其干重,用(湿重-干重)/湿重的百分比,
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