依达拉奉对aβ140诱导pc12细胞nfκb、bcl2 mrna和蛋白表达的影响论文

《依达拉奉对aβ140诱导pc12细胞nfκb、bcl2 mrna和蛋白表达的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、依达拉奉对Aβ140诱导PC12细胞NFκB、Bcl2mRNA和蛋白表达的影响论文【摘要】目的探讨依达拉奉对β淀粉样蛋白(Aβ140)诱导PC12细胞NFκB、Bcl2mRNA和蛋白表达的影响。方法采用CI186对其保护作用。结果模型组中NFκBP65mRNA和蛋白表达水平明显升高，Bcl2mRNA和蛋白表达水平明显降低，与对照组比较有显著差异(P0.01)。保护组中NFκBP65mRNA和蛋白及Bcl2mRNA和蛋白表达与模型组组间比较有统计学意义(均P0.05)，而与对照组比较无统计学意义(P0.05)。结论Aβ140可以活化神经

2、细胞内NFκB，减少Bcl2的表达，发生细胞凋亡。依达拉奉可以抑制NFκB激活，增加Bcl2的表达发挥抗凋亡作用.freela公司，DAB显色试剂盒购自博士德公司,依达拉奉购自江苏先声药业有限公司。1.2方法1.2.1细胞培养和预处理用含有15%胎牛血清的DMEM培养基(3.7gNaHCO3)，置于37℃，5%CO2孵箱中培养，每3天传代1次，传代时用机械方法吹打贴壁的PC12细胞，取生长期细胞用于实验。分为依达拉奉保护组(20μmol/L依达拉奉+Aβ140)，Aβ140模型组(30μmol/LAβ140)和对照组(正常PC12细胞)。1.2

3、.2目的基因mRNA的表达Trizol法提取总RNA。紫外分光光度计测定RNA纯度及含量，28S/18S灰度比约为2∶1。1.2.3逆转录PCR(RTPCR)法首先mRNA反转录合成cDNA第一链。以上述cDNA为模板，以βactin为内参照，分别对NFκBP65和Bcl2进行PCR扩增。大鼠βactin引物：上游引物：5′ATTTGCACCACACTTTCTACA3′，下游引物：5′TCACGCACGATTTCCCTCTCAG3′(扩增长度380bp)。大鼠NFκBP65引物：上游引物：5′AAGATCAATGGCTACACAGG3

4、′，下游引物：5′CCTCAATGTCTTCTTTCTGC3′(扩增长度493bp)。大鼠Bcl2引物：上游引物：5′CTGGTGGACAACATCGCTCTG3′，下游引物：5′GGTCTGCTGACCTCACTTGTG3′(扩增长度441bp)。1.2.4APkinasepathInt，2007;51(67):3619.3PatelJR,.freelotesurvivalinmiddleageneuronsanddeathinoldneurons〔J〕.ExpNeurol，2008;213(1):93100.4TakumidaM，A

5、nnikoM.MCI186administeredtothematernalcirculationinhibitsfetalbraininjuryresultingfromtotalumbilicalcordocclusioninthechronicallyinstrumentedfetallamb〔J〕.JMaternFetalNeonatalMed，2006;19(10):62531.5ThoompsonJE，ThompsonCB.PuttingtheraponAkt〔J〕.JClinOncol，2004;1522(20)：421726.6Hong

6、DJ，PeiAL，ZhuCQ,etal.Aberrantneuronalexpressionofmitoticprotein,tauandBaxintheratbrainafterinjectionofAβ2535intotheamygdala〔J〕.ActaPhysiologicaSinicaJ，2003;55(2):1426.7LiuJH，YinF，GuoXH，etal.NeuroprotectionofgeniposideagainsthydrogenperoxideinducedPC12cellsinjury：involvementofPI3ki

7、nasesignalpathacolSin，2009;30(2):15965.8FisherL，SamueissonD，JiangY.TargetingcytokineexpressioninglialcellsbycellulardeliveryofanNFkappaBdecoy〔J〕.JMolNeurosci，2007;31(3):20919.9TamataniM，MitsudaN，MatsuzakiH,etal.Apathistry，2000;75(2):68393.10ClementiME，PezzoqoriM，OrsiniF，etal.Al

8、zheimer′samyloidbetapepti