肉苁蓉对败血症休克大鼠胸腺细胞凋亡的影响

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1、肉苁蓉对败血症休克大鼠胸腺细胞凋亡的影响【摘要】目的探讨肉苁蓉提取物对败血症休克大鼠胸腺细胞凋亡的影响及其机制。方法60只大鼠随机分为实验组、空白对照组和对照组，各20只，空白对照组分离盲肠后不做结扎、穿孔处理，实验组及对照组行盲肠结扎穿孔术（CLP）建立大鼠败血症休克模型。术前14日开始实验组给予肉苁蓉溶液1.25g/kg，对照组及空白对照组给予等量0.9%氯化钠注射液。于术后12、24h取材。流式细胞仪检测各组胸腺细胞凋亡率和线粒体膜电位，分光光度法测定细胞SOD活性、MDA含量。结果实验组CLP术后12、24h胸腺细胞凋亡率均低于

2、对照组（P<0.01），线粒体膜电位显著上升（P<0.01），细胞超氧化物转化酶(SOD)活性上升、丙二醛(MDA)含量下降与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。结论肉苁蓉提取物对败血症休克时胸腺细胞有保护作用，其机制可能是提高SOD活性，降低MDA含量，清除自由基反应，维持了细胞线粒体膜电位。【关键词】肉苁蓉出血性败血症细胞调亡线粒体超氧化物歧化酶丙二醛动物实验　　EffectofRoucongrongonthymuscellapoptosisinratsia　　【Abstract】ObjectiveToobse

3、rvetheeffectandmechanismofextractofRoucongrongonthymuscellapoptosisinratsia.Methods60ratslydividedintoexperimentalgroup,blankcontrolgroupandcontrolgroup,20ratsineachgroup.Theratsinblankcontrolgroupseparation,entalgroupandcontrolgroupedbycecumligationperforation(CLP)toset

4、upratmodelia.TheratsinthreegroupsensitochondrialmembraneeterandtheactivityofSODandcontentofMDAinedbyspectrophotometry.ResultsThethymuscellapoptoticrateat12hand24haftertheCLPoperationinexperimentalgroupitochondrialmembraneuscellinratsia,itsmechanismmightberelateditochondr

5、ialmembrane.　　【Keyia;Thymuscells;Chondriosome　　败血症休克是临床上常见的危重病症，病死率居高不下。在其病理损伤中，胸腺细胞凋亡的作用日益受到重视。T淋巴细胞的过早凋亡，是引起机体免疫抑制的主要原因之一。本实验探讨了肉苁蓉对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的败血症休克大鼠模型中胸腺细胞凋亡率及细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的影响，现报告如下。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1动物健康雄性DA含量测定试剂盒由南京建成生物研究所提供，Rhodamine123为Sigm

6、a公司产品，其他试剂均为国产分析纯。流式细胞仪型号：EPICS，BeckmanCoulter公司生产。　　1.2实验方法　　1.2.1药品制备肉苁蓉20g水煎3次，煎液合并，浓缩,加入一定量乙醇，静置24h后过滤，滤液放置至无乙醇味，加蒸馏水配成每mL含生药1g的溶液。　　1.2.2模型制备实验组和对照组采用CLP术诱导败血症动物模型的建立，具体参照　　2结果　　2.1HE染色和透射电镜观察术后12h3组胸腺均无明显病理改变，胸腺细胞密集分布于胸腺皮质，细胞核呈圆形，深蓝色着染，胞质少；超微结构观察线粒体，实验组及对照组可见线粒体嵴肿胀

7、现象。术后24h对照组动物胸腺皮质区细胞成分稀疏，淋巴细胞减少，巨噬细胞增多，局部可见灶状坏死及散在的细胞碎片；线粒体嵴肿胀明显，可观察到空化现象出现。实验组动物胸腺细胞碎片较少，线粒体嵴肿胀现象明显减轻。空白对照组胸腺无明显变化。　　2.2各组胸腺细胞凋亡百分率和DNA断裂百分率比较见表1。　　表1各组胸腺细胞凋亡百分率和DNA断裂百分率比较（略）　　与空白对照组比较，*P<0.01；与对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01　　由表1可知，实验组及对照组CLP术后12h胸腺细胞凋亡即显著增加，24h更加明显（P

8、<0.01），但实验组CLP术后12h及24h细胞凋亡百分率及DNA断裂百分率与对照组相应时间比较差异均有统计学意义（P<0.01，P<0.05）。　　2.3各组术后线粒体膜电位见图1。