茅苍术及其组培栽培品挥发油气质联用分析论文

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1、茅苍术及其组培栽培品挥发油气质联用分析论文谷巍，邓海山，巢建国，张莹，候芳洁【摘要】目的研究茅苍术的挥发油，为茅苍术资源的野生抚育及可持续利用提供基础和科学依据。方法用气相色谱和质谱联用技术测定不同产地茅苍术挥发油，并进行聚类分析。结果道地产区茅苍术与其组培栽培品聚为一类，其中主要药效成分苍术酮、苍术素、茅术醇、β-桉叶醇相对百分含量没有显著差异.freeleinedbygaschromatographyandmassspectrometry(GC-MS),andhierarchicalclust

2、eringanalysisegroup.Thereabouttheactiveponentsincludingatractylon,atractydin,hinesol,β-eudesmolandthecontentsofatractylonandatractydinofthisgroupofthem.Theseedingthroughtissueculturecanbeusedasmaterialforadditionalseeding.Keym×30m×0.25μm）；载气为氦气（99.999

3、％）；流速1ml/min；进样口温度250℃；分流进样，分流比为40∶1；进样量2μl；柱升温程序：起始40℃，保持5min，以3℃/min升温至185℃，保持10min，再以5℃/min升温至250℃，保持5min。EI离子源，源温230℃，电子能量为70eV，连接器温度280℃，溶剂延迟5min。扫描范围33～350amu，电子倍增器电压为2.4kV。2.3数据处理经HP-MSD化学工作站检索NIST05质谱图并结合有关文献，对流出的色谱峰进行检索，鉴定化合物。利用GC-MS峰面积归一化法计算

4、各组分在茅苍术挥发油中的相对百分含量，使用SPSS11.5统计软件进行聚类分析和卡方检验,并使用“中药色谱指纹图谱相似性计算”软件(由国家药典委员会主持开发，浙江大学等单位承制)进行相似性计算。3结果3.1主要药效成分比较前人的研究结果表明，茅苍术主要药效成分为苍术酮、苍术素、茅术醇、β-桉叶醇，它们也是体现茅苍术道地性特征的主要成分［1］。我们对这4种成分的相对百分含量进行比较（表2），并以这4种指标成分对不同产地样品进行SPSS聚类分析（见图1）。结果表明，组培栽培品与茅山苍术4种成分相对百分

5、含量没有显著差异，与非道地茅苍术存在显著差异，道地茅苍术中苍术酮和苍术素的含量明显高于非道地茅苍术，而非道地茅苍术中β-桉叶醇和茅术醇则高于道地茅苍术。道地产区茅山、灵山苍术与组培栽培品聚为一类。表24种主要药效成分比较（略）3.2茅苍术挥发油的聚类分析对气质联用测得的9个样品挥发油总离子流图的图谱数据进行SPSS聚类分析，结果见图2。道地产区茅山、灵山苍术与组培栽培品聚为一类，与非道地茅苍术距离较远，表明组培栽培品挥发油与道地茅苍术组成相近，而与其他地区茅苍术的挥发油组成明显不同。这与茅苍术主要

6、药效成分聚类结果相似。3.3茅苍术挥发油的相似度分析将气质联用测得的9个样品挥发油总离子流图的图谱数据导入“中药指纹图谱相似度计算”软件，以1号样品茅山苍术为参照，相似度计算结果见表3。组培栽培品及灵山苍术挥发油与茅山苍术的相似度较高，湖北罗田、英山、河南信阳、安徽霍山茅苍术挥发油与茅山苍术的相似度较低。这与SPSS聚类分析结果相符。表3不同产地茅苍术挥发油的相似度分析（略）4讨论道地药材的形成从生物学角度来看是基因型和环境之间相互作用的产物［6，7］。基因的适应表达控制蛋白质合成的种类和数量，最

7、终影响与其道地性相关药效成分的形成。由于道地药材具有独特的化学成分，从而形成了其独特的“性味”功能［8］，每种药材所含药效成分的种类及其比例是该种药材特有药理作用的基础。茅山苍术是在长期大量临床实践检验的基础上为历代医家推崇和肯定，其它产地的苍术不具备或达不到医者期望的疗效，显然与其独特的道地性特征有关。前人通过研究揭示了道地茅苍术挥发油组分的特征［1］，我们的研究结果与之相符。离体快繁是目前在中药材生产中应用最多、最广泛和最有成效的一种技术之一，对珍稀濒危药用植物的资源保护和品种纯化具有十分重要

8、的意义。我们［4，5］已对道地茅苍术进行了细胞组织培养研究，初步建立了茅苍术的快速繁殖系。对茅苍术挥发油的研究结果显示组培栽培品与茅山苍术聚为一类，相似度分析结果显示两者相似度较高，而与非道地产区有明显的区别，组培栽培品与茅山苍术4种指标成分相对百分含量没有显著差异，也体现了苍术道地性特征。这一结果反映茅苍术的基因组成与种质及生长环境有关。茅苍术组织培养所用外植体取自道地产区，快繁形成的组培苗亦栽种于道地产区，与道地茅苍术的生境相同。研究结果在一定程度上反映利用快速繁殖技术来保护这