芪丹通脉片预防大鼠急性心肌缺血及对vegf, bfgf表达的影响论文

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1、芪丹通脉片预防大鼠急性心肌缺血及对VEGF,bFGF表达的影响论文王宗仁,李晶华,肖铁卉,邵中军,马静,郑谨,马爱玲,龙铟.freelouseacuteinfarctionanditspossiblemechanism.METHODS:SDmiceaxdosegroupandQDTMTmindosegrouprandomly.DifferentconcentrationsofQDTMTinisteredtothefourgroupsatsamedosagetalmodel.Immunohistochemistrymethodsproved.QDT

2、MTenhancedtheexpressionofVEGFandbFGF.CONCLUSION:QiDanTongMaiTabletcanpreventacutemyocardialischemiaandenhancetheexpressionofVEGFandbFGF.【Keyaitablet;VEGF;bFGF【摘要】目的:研究芪丹通脉片(QDTMT)对大鼠急性心肌缺血预防作用及其可能作用机制.方法:采用SD大鼠为研究对象,随机分为假手术组、损伤组、QDTMT大剂量组、QDTMT小剂量组.各组均用生理盐水配置等体积药液灌胃14d,每日2次.冠

3、脉结扎方法制造心肌梗死动物模型,采用心肌酶谱、心梗面积来检测模型,免疫组织化学染色检测缺血心肌血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达.结果:与模型组相比,用药组大鼠血清肌酸激酶同工酶含量降低乳酸脱氢酶[LDH:(946±83)UL-1,(754±75)UL-1vs(1582±90)UL-1,(P0.01);CPK:(1135±69)UL-1,.freelLkg-1);②损伤组(心肌缺血模型组,生理盐水3mLkg-1);③QDTMT大剂量组(2.0gkg-1);④QDTMT小剂量组(1.0gkg-1).用生理盐水配置

4、等体积药液并分别灌胃,2次d-1,连续14d.末次给药1h后,用戊巴比妥麻醉大鼠,气管插管,开胸,距冠状动脉出口5mm处结扎冠状动脉左前降支(LAD),呼吸机维持呼吸.2h后左颈总动脉取血,测定CPK、乳酸脱氢酶(LDH)含量;后断头处死大鼠,将1/2标本立即采用N―BT染色法测定心肌梗死区面积,以梗死区占心室重量的百分比表示梗死面积(IS),观察心肌梗死程度.另一半标本(30只大鼠)取梗死区与非梗死区交界处心肌组织4mm×5mm大小,生理盐水冲洗,40gL-1多聚甲醛中固定24h,常规石蜡包埋.石蜡切片梯度脱蜡,45mLL-1的H2O2室温封闭

5、15min;每张滴加1g100mL-1胰蛋白酶50μL,37℃消化30min;20mLL-1正常羊血清28℃封闭20min.PBS稀释一抗(bFGF1∶50,VEGF1∶100),加一抗50μL,阴性对照片加入等量的PBS.湿盒孵育4℃过夜;滴加1∶200稀释的生物素标记的羊抗兔IgG50μL,28℃孵育30min;滴加ABC液8℃孵育30min;DAB显色液50μL,避光显色5~8min.各步骤之间PBS洗3次,每次5min;自来水冲洗5min终止显色;脱水、透明、树脂封片.bFGF,VEGF为细胞质棕黄色染色.显微镜观察下根据免疫组化染色深度

6、、范围对染色结果综合判断.实验过程中,梗死组和低剂量组各有2只死亡.统计学处理:结果采用x±s表示,采用SPSS软件进行非参数检验.2结果2.1血清心肌酶谱与心肌梗死面积(IS)实验过程中,梗死组和低剂量组各有2只死亡.与对照组相比,LDH含量均增加,且具有显著性差异;与模型组相比LDH含量均减少,且具有显著性差异.与对照组相比,血清肌酸磷酸激酶(CKC)在模型组和低剂量组均增加;与模型组相比各组CKC含量均减少,且有统计学意义.与模型组相比QDTMT低剂量组和QDTMT高剂量组心梗面积均明显减小,差异具有统计学意义.提示QDTMT可以减少缺血对

7、心肌的损伤,具有保护作用(Tab1).表1QDTMT对急性心肌缺血大鼠心肌酶谱及心梗面积影响(略)Tab1InfluenceofQDTMTonmyocardialmuscleenzymesandinfarctionsize(略)图1急性心肌缺血VEGF的表达(略)Fig1VEGFexpressionofinacutemyocardialinfarction×400(略)A:Model;B:QDTMTmin;C:QDTMTmax.图2急性心肌缺血bFGF的表达(略)Fig2bFGFexpressionofinacutemyocardialinfar

8、ction×400(略)A:Model;B:QDTMTmin;C:QDTMTmax.2.2心肌VEGF,bFGF表达假手术组两种因子均没

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